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大肠杆菌检测

  • 原创官网
  • 2025-06-01 15:38:52
  • 关键字:大肠杆菌测试机构,大肠杆菌测试范围,大肠杆菌测试仪器
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大肠杆菌检测概述:检测项目 生化特性检测: 吲哚试验:阳性反应率≥95%(参照ISO 6579) 乳糖发酵:阳性结果确认(如:产酸产气) MR-VP试验:甲基红阳性、V-P阴性(标准生化鉴定) 血清型鉴定: O抗原检测:血清分型(如:O157特异性) H抗原检测:鞭毛分型(参照FDA BAM) K抗原检测:荚膜分型(阳性率评估) 分子生物学检测: PCR扩增:uidA基因检测(灵敏度≤10 CFU/mL) 实时荧光定量PCR:毒力基因stx1/stx2定量(Ct值≤35) 基因测序:16S rRNA序列比对(相似度≥99%


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CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

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检测项目

生化特性检测:

  • 吲哚试验:阳性反应率≥95%(参照ISO 6579)
  • 乳糖发酵:阳性结果确认(如:产酸产气)
  • MR-VP试验:甲基红阳性、V-P阴性(标准生化鉴定)
血清型鉴定:
  • O抗原检测:血清分型(如:O157特异性)
  • H抗原检测:鞭毛分型(参照FDA BAM)
  • K抗原检测:荚膜分型(阳性率评估)
分子生物学检测:
  • PCR扩增:uidA基因检测(灵敏度≤10 CFU/mL)
  • 实时荧光定量PCR:毒力基因stx1/stx2定量(Ct值≤35)
  • 基因测序:16S rRNA序列比对(相似度≥99%)
抗生素敏感性试验:
  • 纸片扩散法:抑菌圈直径测量(参照CLSI M100)
  • MIC测定:最小抑菌浓度(如:氨苄西林MIC≤8μg/mL)
  • ESBL检测:超广谱β-内酰胺酶阳性确认
毒力因子检测:
  • 肠毒素检测:LT/ST毒素阳性(ELISA法)
  • 黏附因子:eae基因表达(阳性率评估)
  • 溶血活性:β-溶血环观察(参照ISO 16654)
环境监测指标:
  • 总大肠杆菌群计数:MPN法(限值≤1 CFU/100mL)
  • 粪大肠杆菌检测:EC培养基阳性(44.5°C培养)
  • 生物膜形成能力:结晶紫染色定量(OD值≥0.1)
食品污染检测:
  • 致病性大肠杆菌筛查:O157:H7特异性(检出限≤1 CFU/g)
  • 指示菌计数:平板法(如:≤10 CFU/mL)
  • 毒素残留检测:ELISA定量(阈值≤0.5ng/mL)
水质安全检测:
  • 大肠杆菌指数:膜过滤法(限值0 CFU/100mL)
  • 耐热大肠杆菌:mFC培养基确认(阳性反应)
  • 生物负荷评估:ATP生物发光法(RLU值≤100)
临床样本分析:
  • 尿液培养:菌落计数(≥10^5 CFU/mL为阳性)
  • 血液感染检测:血培养阳性时间(≤24小时)
  • 耐药基因检测:blaCTX-M基因PCR(阳性确认)
耐药机制研究:
  • 质粒接合试验:转移频率测定(≥10^-6)
  • 生物被膜耐药性:MBEC值测定(如:≥128μg/mL)
  • 整合子检测:intI基因阳性(PCR法)

检测范围

1. 饮用水: 涵盖自来水、瓶装水等,重点检测总大肠杆菌群计数和耐热大肠杆菌,确保符合微生物安全限值

2. 食品类: 包括肉类、乳制品及果蔬,侧重致病性大肠杆菌如O157:H7筛查及毒素残留分析

3. 废水: 涉及工业及生活污水,核心监测大肠杆菌指数和抗生素耐药性,评估处理效果

4. 土壤样本: 覆盖农田及污染场地,重点检测大肠杆菌存活率及生物膜形成能力

5. 临床标本: 如尿液、血液及粪便,着重菌落计数、血清型鉴定及耐药谱分析

6. 动物饲料: 包括禽畜饲料,检测大肠杆菌污染水平和指示菌计数

7. 医疗用品: 如导管及敷料,核心评估无菌状态和大肠杆菌生物负荷

8. 水产品: 涵盖鱼类及贝类,重点监测肠毒素产生菌和活菌定量

9. 空气样本: 涉及室内外环境,检测空气传播大肠杆菌浓度及毒力因子

10. 化妆品: 包括护肤品及洗剂,侧重微生物限度测试和大肠杆菌特异性检测

检测方法

国际标准:

  • ISO 16654:2001 食品中大肠杆菌O157检测方法
  • ISO 9308-1:2014 水质大肠杆菌计数膜过滤法
  • FDA BAM Chapter 4 大肠杆菌及大肠菌群检测
  • CLSI M100 抗菌药物敏感性试验标准
  • ISO 6579-1:2017 食品微生物学沙门氏菌检测(含大肠杆菌鉴定)
国家标准:
  • GB 4789.3-2016 食品微生物学检验大肠菌群计数
  • GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法微生物指标
  • GB 15979-2002 一次性卫生用品卫生标准(大肠杆菌检测)
  • GB 4789.38-2012 食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数
  • GB/T 13093-2006 饲料中细菌总数测定方法
(方法差异说明:ISO膜过滤法使用mEndo培养基而GB采用EC培养基;FDA BAM侧重多管发酵法而GB 4789.3优先平板计数;CLSI纸片扩散法与GB方法在抑菌圈判读上存在温度差异)

检测设备

1. 恒温培养箱: Memmert IN260型(温度范围20-60°C,精度±0.1°C)

2. 实时荧光定量PCR仪: Bio-Rad CFX96型(检测限达10拷贝/μL,热循环速率5°C/s)

3. 生物安全柜: Esco Airstream AC2-4S型(洁净度Class II,风速0.4m/s)

4. 全自动微生物鉴定系统: VITEK 2 Compact型(鉴定准确率≥95%,测试卡容量64位)

5. 酶标仪: Thermo Multiskan FC型(波长范围340-850nm,精度±1%)

6. 膜过滤装置: Millipore S-Pak型(孔径0.45μm,流量100mL/min)

7. 厌氧培养箱: Don Whitley DG250型(氧气浓度≤0.1%,温度控制35°C)

8. 离心机: Eppendorf 5430R型(转速范围100-30,000rpm,容量24×1.5mL)

9. 电泳仪: Bio-Rad PowerPac Basic型(电压范围10-300V,电流0.1-3A)

10. 菌落计数器: Scan 500型(分辨率0.1mm,计数容量≥500CFU)

11. 紫外分光光度计: Shimadzu UV-1800型(波长范围190-1100nm,带宽1nm)

12. 自动稀释仪: Hamilton Microlab 600型(稀释精度±0.5%,通量96孔)

13. 振荡培养箱: New Brunswick Innova 44型(转速50-500rpm,振幅25mm)

14. 冷冻干燥机: Christ Alpha 1-4型(温度-55°C,真空度≤0.01mbar)

15. 显微镜: Olympus CX43型(放大倍数40-1000×,分辨率0.2μm)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是与大肠杆菌检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

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