悬浮细胞检测

检测项目

细胞计数检测：

• 活细胞计数：细胞密度（cells/mL，参照ISO8655-6）、死细胞比率（≤5%）
• 悬浮密度评估：沉降速率（mm/h）、聚集指数（≤10%）

细胞活力检测：

• 代谢活性：MTT比色法（吸光度值≥0.8）、台盼蓝排斥率（≥90%）
• 酶活性检测：LDH释放量（IU/L，参照ASTMF2315）

形态分析检测：

• 细胞直径：平均直径（μm±10%）、形态异常率（≤5%）
• 核质比评估：核直径/胞质直径（1.0-1.5）

污染鉴定检测：

• 细菌污染：PCR检测限（copies/μL≤10）、支原体阳性率（0%）
• 真菌污染：孢子计数（cells/mL≤100）

增殖动力学检测：

• 倍增时间：小时数（≤24h）、细胞周期分布（G1/S/G2比率50%/30%/20%）
• 克隆形成率：集落数/接种数（≥80%）

代谢产物检测：

• 葡萄糖消耗：速率（mmol/L/day≤10）、乳酸积累量（g/L≤2）
• 氧气消耗率：DO变化（mg/L/min≤0.1）

基因表达检测：

• mRNA定量：qPCRCt值（≤25）、基因拷贝数（copies/cell≥50）
• 突变筛查：SNP检出率（≥99%）

蛋白表征检测：

• 表面标记物：流式阳性率（%≥95）、分泌蛋白浓度（ng/mL≥100）
• 酶联免疫：吸光度阈值（OD≥0.5）

细胞周期检测：

• S期分数：百分比（%≥20）、凋亡指数（%≤5）
• DNA含量：PI染色荧光强度（AU≤500）

凋亡坏死检测：

• AnnexinV阳性：比率（%≤10）、Caspase活性（RFU≤50）
• 膜完整性：碘化丙啶渗透率（%）

检测范围

1.哺乳动物悬浮细胞：CHO、HEK293等工程细胞系，重点检测生长曲线稳定性和重组蛋白表达效率

2.细菌悬浮培养：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等，侧重抗生素敏感性测试和代谢副产物积累

3.酵母悬浮细胞：酿酒酵母、毕赤酵母类，检测重点为发酵效率和杂质残留水平

4.干细胞悬浮培养：间充质干细胞、iPSC等，侧重多能性维持和分化潜力评估

5.肿瘤细胞悬浮系：K562、Jurkat等肿瘤细胞，重点检测耐药性指标和侵袭迁移能力

6.免疫细胞悬浮：T细胞、NK细胞等免疫效应细胞，检测重点为激活状态和细胞毒性功能

7.原代细胞悬浮：肝细胞、神经元等原代分离细胞，侧重纯度和功能活性保持

8.病毒生产细胞：Vero、Sf9等用于病毒扩增的细胞，检测重点包括病毒滴度和细胞存活率

9.微藻类悬浮细胞：小球藻、螺旋藻等光合微藻，侧重光合活性效率和生物量积累速率

10.昆虫细胞悬浮培养：Sf21、HighFive等昆虫细胞系，检测重点为杆状病毒感染效率和重组蛋白产量

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价—体外细胞毒性试验方法
• ASTMF2315-18细胞计数和活力评估标准方法
• ISO8655-6:2022悬浮细胞密度测定—光学粒子计数法

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价—体外细胞毒性试验
• GB/T5750.12-2006生活饮用水标准检验方法—微生物指标（细胞污染部分）
• GB/T37841-2019细胞培养技术通则（悬浮细胞增殖检测）

方法差异说明：ISO10993-5采用直接接触法评估细胞毒性，而GB/T16886.5增加了提取液间接法选项；ASTMF2315规定台盼蓝染色时间≤3分钟，GB/T37841延长至5分钟以提高准确性。

检测设备

1.流式细胞仪：FACSCantoII型（检测通道：8色激光，流速精度±2%）

2.倒置显微镜：IX73型（放大倍数：1000x，分辨率0.2μm）

3.血细胞计数器：Neubauerchamber型（网格精度：0.1mm²，深度0.1mm）

4.酶标仪：MultiskanGO型（波长范围：400-700nm，精度±0.01OD）

5.PCR仪：T100型（温控范围：4°C-99°C，精度±0.1°C）

6.CO2培养箱：Heracell150i型（温度范围：室温+5°C至50°C，CO2控制±0.1%）

7.离心机：5810R型（最大转速：15,000rpm，容量6×1000mL）

8.荧光显微镜：DMi8型（激发光源：多波段LED，灵敏度>5000lux）

9.生物反应器：BiostatB-DCU型（工作体积：0.5-10L，DO控制±1%）

10.细胞计数器：CountessIIFL型（检测范围：1×10^4至1×10^7cells/mL，误差≤2%）

11.气相色谱仪：8890型（检测器：FID，灵敏度0.1ppm）

12.液相色谱仪：ACQUITYUPLC型（流速范围：0.001-5mL/min，精度±0.1%）

13.分光光度计：UV-2600i型（波长精度：±0.3nm，扫描速度200nm/min）

14.冷冻干燥机：FreeZone1型（真空度：<10Pa，冷凝温度-84°C）

15.超低温冰箱：Forma900系列（温度范围：-86°C±1°C，容量

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"悬浮细胞检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。