检测项目

样本处理：

• 样本预处理：离心速度（3000g，10min，参照ISO 15189）、缓冲液pH值（7.2-7.4）
• 核酸提取：纯度（A260/A280≥1.8）、产量（≥50ng/μL）
• 病毒富集：超速离心参数（100,000g，2h）

• 细胞接种：细胞密度（1×10^5 cells/mL）、感染复数（MOI=0.1）
• 病毒扩增：培养时间（24-72h）、温度（37±1℃）
• CPE观察：病变评分（0-4级，参照WHO指南）

• RT-PCR：扩增循环数（40 cycles）、Ct值阈值（≤35）
• qPCR检测：灵敏度（LOD≤10 copies/μL）、特异性（无交叉反应）
• 基因测序：覆盖率（≥99%）、错误率（≤0.1%）

• ELISA测试：吸光度值（OD450≥0.5）、cut-off值（阴性对照+0.2）
• 免疫荧光：荧光强度（≥200 RFU）、背景噪声（≤50 RFU）
• 侧流层析：检测线显色时间（≤15min）

• 中和试验：抗体效价（≥1:80）、病毒抑制率（≥90%）
• ELISA抗体：IgG/IgM比值（≥1.0）、临界值（S/CO≥1.0）
• Western Blot：条带强度（灰度值≥150）

• 滴度测定：TCID50/mL（log10≥4.0）、PFU计数（≥50 plaques）
• 病毒载量：copies/mL（线性范围10^2-10^8）
• 颗粒计数：电镜观察（粒径50-200nm）

• 序列比对：同源性（≥95%）、突变位点检测
• 进化树构建：bootstrap值（≥70）
• SNP检测：灵敏度（≤5% minor allele）

• 抗病毒测试：IC50值（≤10μM）、EC50值（≤5μM）
• 耐药性检测：突变频率（≥1%）
• 细胞毒性：CC50值（≥100μM）

• 水样检测：病毒回收率（≥70%）、检测限（10^2 copies/L）
• 空气采样：流量（10L/min）、捕获效率（≥80%）
• 表面拭子：面积采样（100cm²）、洗脱率（≥90%）

• 阳性对照：Ct值（≤30）、阴性对照（Ct≥40）
• 重复性：CV值（≤15%）
• 稳定性：储存温度（-80℃）、有效期（≥6个月）

检测范围

1. 呼吸道样本： 鼻咽拭子、痰液及支气管肺泡灌洗液，重点检测流感病毒、呼吸道合胞病毒和SARS-CoV-2的病毒载量与变异株。

2. 血液样本： 全血、血清或血浆，侧重检测乙型肝炎病毒、HIV的核酸水平与抗体应答，确保溶血干扰最小化。

3. 粪便样本： 腹泻物或直肠拭子，针对轮状病毒、诺如病毒的分离与抗原检测，强调样本均质化处理。

4. 组织样本： 活检或尸检组织如肝脏、脑组织，重点检测疱疹病毒、狂犬病病毒的病毒分布与病理关联。

5. 细胞培养物： Vero或MDCK细胞系，用于病毒扩增与滴定，确保细胞活率≥95%。

6. 环境水样： 污水、地表水或饮用水，侧重肠道病毒如脊灰病毒的浓缩检测，关注过滤效率。

7. 食品样本： 肉类、果蔬或乳制品，针对甲肝病毒、诺如病毒的污染监测，重点在病毒复苏率。

8. 空气样本： 气溶胶或飞沫收集，用于流感病毒、麻疹病毒的空气传播评估，强调采样体积一致性。

9. 生物制品： 疫苗或血液制品，检测残留病毒如SV40，确保无菌与安全性。

10. 医疗器械： 内窥镜或导管表面，针对乙肝病毒、丙肝病毒的消毒效果验证，侧重拭子采样覆盖率。

检测方法

国际标准：

• ISO 15189:2022 医学实验室质量和能力要求
• WHO/BS/2020.2403 病毒核酸检测指南
• ISO 15216-1:2017 食品中病毒检测方法
• CLSI M53-A 病毒培养和鉴定标准

• GB/T 19438.1-2022 病毒核酸检测通用要求
• GB/T 40982-2021 新型冠状病毒核酸检测方法
• GB 4789.42-2022 食品微生物检验病毒部分
• GB/T 33411-2022 临床血清学检测规范

检测设备

1. 生物安全柜： Baker SG603型（Class II A2，气流速度0.5m/s，HEPA过滤效率99.99%）

2. 离心机： Eppendorf 5430R型（转速范围100-15,000rpm，容量4×100mL）

3. PCR仪： Applied Biosystems 7500型（温度精度±0.1℃，通道数5）

4. 核酸提取仪： QIAGEN Qiacube型（通量12样本/批次，回收率≥95%）

5. 酶标仪： BioTek Synergy H1型（波长范围200-999nm，检测限0.001 OD）

6. 流式细胞仪： BD FACSCanto II型（激光数3，流速12μL/min）

7. 电镜： JEOL JEM-1400型（分辨率0.38nm，放大倍数50-1,000,000×）

8. 细胞培养箱： Thermo Scientific Heracell 150i型（温度控制37±0.1℃，CO2浓度5%）

9. 病毒计数器： NanoSight NS300型（粒径范围10-2000nm，计数精度±5%）

10. 自动化工作站： Hamilton STARlet型（移液精度0.5μL，通量96孔板）

11. 荧光显微镜： Olympus BX53型（物镜倍数4-100×，荧光滤镜组4）

12. 超低温冰箱： Thermo Scientific Forma 900型（温度-86℃，容量700L）

13. 水浴锅： Memmert WNB14型（温度范围5-99℃，稳定性±0.1℃）

14. 空气采样器： SKC BioSampler型（流量10L/min，捕获效率80%）

15. 光谱仪： Agilent Cary 60型（波长范围190-1100nm，带宽

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是与病毒分离检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。