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小鼠精液检测

  • 原创官网
  • 2025-06-03 09:45:31
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小鼠精液检测概述:小鼠精液检测聚焦生殖生物学研究核心参数,通过标准化程序评估雄性小鼠生育力及生殖毒性。核心检测对象包括精子浓度、活力分级(前向运动/非前向运动/不动精子)、形态学异常率及存活率。关键项目涵盖精子功能指标(顶体完整性、线粒体膜电位)和生化分析(精浆果糖、酸性磷酸酶)。检测严格遵循WHO实验动物精液分析指南及GLP规范,为基因修饰模型评价、药物生殖毒性测试提供量化依据。


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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

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检测项目

精液常规分析:

  • 精子浓度:(5-20)×10⁶/mL(参照WHO 2021动物实验指南)
  • 精子活力:前向运动(PR)≥40%、非前向运动(NP)≤15%、不动(IM)≤45%
  • 精子存活率:伊红拒染法≥75%(ISO 23162:2021)
精子形态学检测:
  • 头部畸形率:Diff-Quik染色≤30%(参照Kruger严格标准)
  • 尾部缺陷率:扫描电镜分析≤15%
  • 顶体完整性:FITC-PSA荧光染色≥60%
精子功能检测:
  • 线粒体活性:JC-1荧光探针红绿比≥1.5
  • 质膜完整性:HOS低渗膨胀试验≥70%
  • 获能状态:酪氨酸磷酸化免疫荧光检测
生化指标分析:
  • 精浆果糖:≥13μmol/次射精(比色法)
  • 酸性磷酸酶:≥200U/mL(PNPP底物法)
  • 超氧化物歧化酶:≥15U/mg蛋白(黄嘌呤氧化酶法)
遗传物质检测:
  • DNA碎片指数:SCD彗星试验≤25%(参照Sakkas标准)
  • 染色体结构:CMA3荧光染色检测鱼精蛋白缺失
  • 表观遗传标记:5-甲基胞嘧啶免疫荧光定量
微生物学检测:
  • 病原体筛查:PCR检测MHV、MPV等12种特异性病毒
  • 细菌培养:需氧菌计数≤10³CFU/mL(GB 4789.2-2022)
低温生物学指标:
  • 冷冻复苏率:程序降温后活率≥基础值50%
  • 顶体完整维持率:冻融后≥40%
生殖毒性专项:
  • 畸形精子指数:≥1.6判定生殖毒性(参照Teratozoospermia指数)
  • 核空泡化率:高分辨率显微镜检测≤10%
代谢组学分析:
  • 三羧酸循环代谢物:LC-MS定量柠檬酸/琥珀酸比值
  • 活性氧水平:DCFH-DA荧光法≤100RLU/s×10⁶精子
流式细胞术检测:
  • 凋亡精子比例:Annexin V/PI双染≤15%
  • 乙酰化组蛋白定位:流式免疫荧光强度分析

检测范围

1. 近交系实验鼠: C57BL/6J、BALB/c等品系,侧重基础生殖参数数据库建立

2. 基因编辑模型: CRISPR/Cas9技术构建的转基因/基因敲除鼠,检测基因突变对精子发生的影响

3. 疾病模型鼠: 糖尿病(db/db)、肥胖(ob/ob)模型,关注代谢异常与精子质量关联性

4. 药物毒性测试: 化疗药物(环磷酰胺)、环境毒素(双酚A)暴露模型,检测剂量依赖性损伤

5. 辐射损伤模型: γ射线全身辐照鼠,重点分析DNA碎片率与凋亡通路激活

6. 衰老研究模型: SAMP8快速老化鼠,检测年龄相关的线粒体功能衰退

7. 营养干预研究: 维生素D缺乏/高脂饮食模型,评估营养状态与精子抗氧化能力

8. 病原体感染模型: 腮腺炎病毒接种鼠,检测病毒性睾丸炎后精子发生障碍

9. 精子冷冻保存样本: 程序化冷冻/玻璃化冷冻精子,评估低温保护剂优化效果

10. 辅助生殖技术样本: IVF/ICSI操作后精子,检测人工选择对精子功能参数的影响

检测方法

国际标准:

  • WHO 2021《人类精液检查与处理实验室手册》(动物实验附录)
  • ISO 23162:2021《精液分析-精子活力与浓度测定》
  • OECD 488《转基因品系遗传毒性检测指南》
国家标准:
  • GB/T 35823-2018《实验动物 精液质量检测》
  • GB 4789.2-2022《食品微生物学检验 菌落总数测定》(微生物检测参照)
  • GB/T 28628-2012《材料诱发生殖细胞突变试验方法》
(方法差异说明:WHO标准采用Makler计数板分析浓度,GB标准推荐计算机辅助精子分析系统;ISO规定37℃恒温检测环境,GB要求25±1℃环境温控)

检测设备

1. 计算机辅助精子分析系统: SCA Evolution微型版(分辨率1μm,帧频60fps,温控37±0.5℃)

2. 相差显微成像系统: Olympus BX53(400×相衬物镜,CCD分辨率2048×2048)

3. 流式细胞仪: Beckman CytoFLEX S(3激光8色,检测速率35,000事件/秒)

4. 激光共聚焦显微镜: Leica TCS SP8(HyD探测器,Z轴分辨率0.5μm)

5. 荧光显微检测系统: Nikon Eclipse Ti2(LED光源,6通道荧光滤块)

6. 超微量分光光度计: Thermo NanoDrop One(检测范围2-27,000ng/μL)

7. 程序降温仪: Planer Kryo560(降温速率0.1-50℃/min,液氮喷射控制)

8. 多功能酶标仪: BioTek Synergy H1(光栅单色器,波长范围200-999nm)

9. 高效液相色谱仪: Agilent 1260 Infinity II(DAD检测器,精度±0.25nm)

10. 质谱分析系统: SCIEX TripleTOF 6600(质量精度<3ppm,扫描速度100Hz)

11. PCR扩增仪: Bio-Rad T100(温控精度±0.2℃,升降温速率5℃/s)

12. 超低温生物样本库: Thermo Forma 900系列(-150℃气相液氮存储)

13. 生物安全柜: Esco Airstream AC2-4S1(ISO 5级洁净度,风速0.3m/s)

14. 细胞能量代谢分析仪: Agilent Seahorse XFe96(实时监测OCR/ECAR)

15. 全自动精子形态分析仪: SQA-Vision(AI识别算法,200个形态学参数

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是与小鼠精液检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

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