检测项目
细胞活力检测:
- 存活率测定:存活率(≥95%,参照ISO10993-5)
- LDH释放检测:释放量(U/L)、细胞毒性指数(%)
- MTT比色法:吸光度(450nm)、半抑制浓度(IC50值)
- 形态参数量化:细胞面积(μm²)、形状因子(无量纲)
- 伪足检测:伪足长度(μm)、覆盖率(%)
- 核质比分析:核面积占比(%)
- 倍增时间计算:倍增时间(小时)、增殖速率(%/h)
- CCK-8检测:吸光度值(450nm)、细胞数量(个/cm²)
- EdU标记:阳性细胞率(%)
- AnnexinV/PI双染:阳性率(%)、早期凋亡指数
- Caspase活性检测:Caspase-3活性(RFU)、半胱天冬酶释放量
- DNA片段化:片段化指数(%)
- 粘附力测试:粘附力(nN)、脱离时间(秒)
- 覆盖率分析:表面覆盖率(%)、粘附密度(个/mm²)
- 细胞铺展:铺展面积(μm²)
- 划痕实验:迁移距离(μm)、愈合率(%/h,参照ISO23158)
- Transwell检测:迁移细胞数(个)、侵袭指数
- 时间推移成像:速度(μm/min)
- 药物敏感性:IC50值(μg/mL)、最大耐受浓度
- 活性氧检测:ROS水平(RFU)、氧化应激指数
- 膜完整性:PI渗透率(%)
- 周期分布:G1/S/G2M比例(%)、S期指数
- DNA含量:倍体指数
- 增殖指数:PI值(%)
- qPCR分析:mRNA相对表达量(foldchange)、Ct值
- 基因沉默效率:沉默率(%)
- 启动子活性:荧光强度(AU)
- Westernblot:条带强度(AU)、蛋白相对量
- 免疫荧光:荧光信号强度(RFU)、共定位系数
- ELISA检测:浓度(pg/mL)、吸光度(450nm)
检测范围
1.Hela细胞系:侧重人宫颈癌细胞,重点检测增殖速率和迁移特性
2.MCF-7细胞系:乳腺癌细胞模型,强调激素响应凋亡和药物敏感性
3.原代成纤维细胞:来源于皮肤组织,检测老化相关形态变化和活力衰减
4.间充质干细胞:骨髓或脂肪来源,评估分化潜能和粘附稳定性
5.神经元细胞:原代或诱导神经元,突触形成检测和电生理功能分析
6.内皮细胞:血管内皮模型,血管生成能力和迁移距离量化
7.肝细胞:肝原代细胞或HepG2系,代谢功能及毒性响应测试
8.免疫细胞:T细胞或巨噬细胞,细胞因子分泌和活化状态监测
9.癌细胞系:包括A549等,药物筛选中的IC50值测定
10.转基因细胞:基因编辑模型,基因表达稳定性和蛋白表达量验证
检测方法
国际标准:
- ISO10993-5体外细胞毒性试验
- ASTMF2315细胞粘附测试方法
- ISO23158细胞迁移划痕试验规范
- GB/T16886.5医疗器械生物学评价第5部分:细胞毒性试验
- GB/T39786细胞培养技术规范
- GB/T20448细胞活力检测方法
检测设备
1.倒置显微镜:NikonEclipseTi2(分辨率0.22μm,放大倍数1000x)
2.流式细胞仪:BDFACSCantoII(检测通道8个,流速12μL/min)
3.酶标仪:BioTekSynergyH1(波长范围200-1000nm,精度±0.01AU)
4.实时PCR仪:AppliedBiosystems7500(灵敏度0.1fgDNA,温度控制±0.1℃)
5.细胞培养箱:ThermoScientificHeracell150i(CO2控制精度±0.1%,湿度95%)
6.离心机:Eppendorf5810R(最大转速15000rpm,容量6x500mL)
7.微孔板读板器:PerkinElmerEnVision(检测模式多光谱,通量384孔)
8.细胞计数器:CountessIIFL(自动聚焦精度1μm,计数范围10^3-10^7个/mL)
9.电生理系统:AxonInstrumentsMultiClamp700B(采样率50kHz,阻抗测量范围1MΩ-1GΩ)
10.激光共聚焦显微镜:ZeissLSM900(Z轴分辨率0.35μm,激光波长405-640nm)
11.超低温冰箱:HaierDW-86L338(温度-86℃,容积338L)
12.生物安全柜:ESCOAirstreamAC2-4S1(风速0.45m/s,HEPA过滤效率99.99%)
13.振动切片机:LeicaVT1000S(切割精度1μm,振幅可调0-2mm)
14.细胞电转仪:Bio-RadGenePulserXcell(电压范围10-3000V,脉冲宽度10-100ms)
15.分光光度计:ShimadzuUV-1900i(波长精度±0.3nm,扫描速度2400nm/min)