同工酶谱检测

检测项目

酶活性检测：

• 乳酸脱氢酶活性：总活性(U/L)、LDH1/LDH2比率（参照临床诊断标准）
• 肌酸激酶活性：CK-MB百分比（特异性≥95%）
• 碱性磷酸酶活性：总活性(IU/L)、骨源同工酶比例

同工酶分离：

• 电泳分离：分辨率(≥0.5mm)、迁移率（参照标准图谱）
• 色谱分离：保留时间偏差(±0.1min)、峰面积精度
• 毛细管电泳：分离效率(≥100,000理论板数)

定量分析：

• 同工酶百分比计算：相对丰度(%)、误差范围(±2%)
• 浓度测定：检测限(≤0.01U/mL)、定量限(≤0.05U/mL)
• 标准曲线拟合：线性相关系数(R²≥0.99)

质量控制：

• 精密度验证：批内CV(≤5%)、批间CV(≤10%)
• 准确度评估：回收率(95%-105%)
• 稳定性测试：室温偏差(±5%)

灵敏度分析：

• 检测限确定：最低可测活性(0.001U/mL)
• 定量限验证：LOQ值(0.005U/mL)
• 动态范围：线性区间(0.01-100U/mL)

特异性检测：

• 交叉反应性：干扰物质耐受(≤5%偏差)
• 基质效应：回收率变异(±3%)
• 选择性测试：非目标酶抑制率(≤1%)

临床应用指标：

• 心肌标志物：LDH同工酶谱、CK-MB阈值(≥25ng/mL)
• 肿瘤标志物：ALP同工酶亚型、异常谱带检出
• 肝病指标：GGT同工酶比例、病理临界值

方法验证：

• 线性范围验证：斜率偏差(±0.05)
• 回收率测试：加标回收(90%-110%)
• 耐用性评估：参数波动容忍(±2%)

标准品校准：

• 校准曲线建立：截距误差(≤0.1)
• 标准品浓度：认证值偏差(±0.5%)
• 溯源性：参考物质符合度

稳定性测试：

• 储存稳定性：-20℃偏差(±3%)
• 操作稳定性：重复冻融次数(≤3次)
• 实时老化：活性衰减率(≤1%/月)

检测范围

1.人体血清样本：用于心肌梗死和肝病诊断，重点检测LDH和CK同工酶谱变化

2.血浆样本：凝血功能相关分析，侧重抗凝剂干扰下的同工酶活性

3.尿液样本：肾脏疾病标志物检测，重点分析碱性磷酸酶同工酶异常

4.脑脊液样本：神经系统疾病诊断，侧重LDH同工酶亚型鉴定

5.组织匀浆样本：肿瘤活检分析，重点检测同工酶谱带迁移率

6.细胞培养上清液：细胞代谢研究，侧重酶活性动态变化

7.食品提取物：食品安全监控，重点检测微生物源同工酶污染

8.环境水样：水质生物指标分析，侧重细菌同工酶活性测定

9.发酵液样本：工业生物过程控制，重点监测同工酶稳定性

10.生物制品：疫苗和酶制剂质检，侧重同工酶纯度和一致性

检测方法

国际标准：

• ISO15189:2022医学实验室质量和能力具体要求
• CLSIEP05-A3酶活性测定精密度评价指南
• IFCC方法乳酸脱氢酶同工酶检测规范

国家标准：

• GB/T37864-2019生物样品中酶活性测定通用方法
• GB/T5009.XX食品中酶同工酶谱检测技术
• YY/T1256-2015体外诊断试剂同工酶检测要求

方法差异说明：ISO标准强调实验室质量管理，GB标准更注重样本前处理步骤；CLSI与IFCC在酶活性单位定义上存在差异，IFCC使用国际单位，CLSI侧重临床验证；GB/T与ISO在电泳条件设置上，GB规定更严格的缓冲液pH范围。

检测设备

1.电泳系统：Bio-RadMini-PROTEANTetra（电压范围50-300V，分辨率0.1mm）

2.分光光度计：ShimadzuUV-2600i（波长范围190-1100nm，精度±0.1nm）

3.高效液相色谱仪：Agilent1260InfinityII（流速范围0.001-10mL/min，检测限0.01ng）

4.离心机：Eppendorf5430R（转速范围100-30,000rpm，温控±0.5℃）

5.凝胶成像系统：Bio-RadChemiDocMP（灵敏度0.1pg，像素500万）

6.酶标仪：ThermoScientificMultiskanSky（波长范围340-850nm，精度±1%）

7.恒温孵育箱：MemmertIN110（温度范围5-100℃，均匀度±0.3℃）

8.微量加样器：EppendorfResearchplus（量程0.1-1000μL，误差±0.5%）

9.纯水系统：MilliporeMilli-Q（电阻率18.2MΩ·cm，TOC≤5ppb）

10.pH计：MettlerToledoSevenExcellence（测量范围0-14，精度±0.01）

11.天平：SartoriusCubisII（量程0.001g-500g，精度±0.0001g）

12.混合器：IKAMS3digital（转速100-3000rpm，时间控制±1s）

13.冷冻储存箱：ThermoScientificTSX（温度范围-86℃至-20℃，波动±1℃）

14.电泳电源：Bio-RadPowerPacHC（电流范围0-500mA，电压稳定度±0.1%）

15.活性染色装置：HoeferSE600（染色均匀度≥95%，温控精度±0.5℃）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"同工酶谱检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。