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细胞周期检测

  • 原创官网
  • 2025-06-11 11:38:41
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相关:

细胞周期检测概述:细胞周期检测是评估细胞增殖动态的核心技术,专注于量化细胞周期各阶段(G0/G1、S、G2/M)的分布与调控机制。核心检测对象包括DNA含量(通过碘化丙啶染色测量DNA指数)、细胞周期蛋白表达(如CyclinB1、CDK2的荧光强度定量)和增殖指数(S期细胞比例)。关键项目涉及流式细胞术分析DNA倍性、免疫印迹法检测蛋白磷酸化状态,以及BrdU掺入实验评估DNA合成速率,用于揭示细胞生长异常、药物干预效应或病理进程中的周期失调。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

DNA含量分析:

  • DNA指数测定:DI值(参照ISO13385)、S期比例(SPF%)
  • 倍性稳定性检测:异倍体细胞比例(≥5%阈值)
蛋白表达检测:
  • CyclinB1表达:相对荧光强度(RFU)
  • CDK2活性测定:酶活性单位(U/mg蛋白)
细胞周期阶段鉴定:
  • G0/G1期比例:细胞计数百分比(%)
  • G2/M期阻滞分析:有丝分裂指数(MI≥0.5%)
增殖活性评估:
  • Ki-67标记指数:阳性细胞率(%)
  • BrdU掺入率:掺入细胞比例(参照GB/T16886.5)
凋亡关联检测:
  • AnnexinV阳性率:凋亡细胞占比(%)
  • Caspase-3活性:催化速率(U/mL)
信号通路分析:
  • p53蛋白表达:Westernblot定量(灰度值)
  • Rb磷酸化状态:磷酸化位点检出率(%)
细胞同步化验证:
  • 胸腺嘧啶阻断效率:同步化细胞比例(%)
  • 诺考达唑处理效果:G2/M期积累率(≥90%)
染色体稳定性测试:
  • 微核率测定:微核细胞频率(‰)
  • 染色体畸变分析:畸变细胞计数(参照ISO10993-5)
调控因子检测:
  • p21表达水平:qPCRCt值
  • E2F转录因子活性:相对荧光报告值
动力学参数计算:
  • 细胞周期时间:总时长(小时)
  • 分裂间隔:平均倍增时间(h)

检测范围

1.肿瘤细胞系:涵盖HeLa、MCF-7等常用线虫,重点检测p53突变导致的G1/S期过渡异常及化疗药物响应

2.干细胞样本:包括iPSC和胚胎干细胞,侧重自我更新过程中周期蛋白动态变化与分化关联性

3.原代细胞:如肝细胞或神经元,评估原代培养下的周期同步性及衰老相关阻滞效应

4.动物组织切片:小鼠或大鼠肝脏/肾脏冰冻切片,检测体内微环境中的细胞周期分布与损伤修复机制

5.植物细胞:拟南芥或烟草细胞,重点分析光周期调控下的DNA合成速率与生长因子影响

6.细菌培养物:大肠杆菌或枯草芽孢杆菌,检测分裂周期同步化效率及抗生素干预下的延迟效应

7.酵母模型:酿酒酵母细胞,用于研究细胞周期调控基因(如CDC28)突变导致的G2/M期缺陷

8.血液样本:人外周血淋巴细胞,侧重免疫刺激后的增殖激活及细胞周期蛋白表达谱分析

9.固定组织:福尔马林固定石蜡包埋样本,通过免疫组化检测Ki-67表达以评估增殖活性

10.3D培养模型:类器官或球状体,模拟体内条件下细胞周期动力学与药物渗透相关性

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5体外细胞毒性试验(涵盖BrdU掺入法检测DNA合成)
  • ASTMF2315流式细胞术分析标准(规定DNA染色与细胞周期分选流程)
  • ISO13385DNA含量测定指南(PI染色流式标准协议)
国家标准:
  • GB/T16886.5医疗器械生物学评价-细胞毒性试验(包含细胞周期阻滞评估方法)
  • GB/T33205细胞增殖检测技术规范(规定免疫荧光法检测周期蛋白)
  • GB/T35428流式细胞术操作规范(明确细胞周期分析参数设置)
方法差异说明:ISO标准强调PI染色浓度优化,而GB标准更注重样本预处理温度控制;ASTMF2315要求激光波长校准,GB/T35428则细化数据分析软件参数。

检测设备

1.流式细胞仪:BDFACSCalibur(检测通道:488nm激光,FL1-FL4荧光通道)

2.荧光显微镜:OlympusIX73(物镜:40x油镜,数值孔径1.3)

3.PCR仪:AppliedBiosystems7500(温度范围:4-99°C,精度±0.1°C)

4.酶标仪:BioTekSynergyH1(波长范围:220-900nm,分辨率1nm)

5.离心机:Eppendorf5430R(最大转速:15000rpm,容量适配器至50mL)

6.细胞培养箱:ThermoScientificHeracell150i(CO2控制范围:0-20%,精度±0.1%)

7.Westernblot系统:Bio-RadMini-PROTEANTetra(凝胶尺寸:8cmx10cm,电压范围50-200V)

8.显微镜相机:NikonDS-Fi3(分辨率:5MP,帧率30fps)

9.细胞计数器:CountessIIFL(聚焦精度:±1μm,检测速度<10秒/样本)

10.冷冻切片机:LeicaCM1950(切片厚度:1-100μm,温度范围-35至-5°C)

11.水浴锅:MemmertWNB14(温度稳定性:±0.1°C,容量14L)

12.PH计:MettlerToledoSevenExcellence(精度:±0.001,校准范围0-14)

13.精密天平:SartoriusCubis(量程:0.001g-300g,误差±0.1mg)

14.微量移液器:EppendorfResearchplus(体积范围:0.1-1000μL,精度±1%)

15.生物安全柜:ESCOAirstreamASH-360(气流速率:0.45m/s,HEPA过滤效率99.99%)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

  以上是与细胞周期检测相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

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