沙门氏菌筛查

检测项目

初步筛查检测：

• 预增菌培养：检出限≤1CFU/25g（参照ISO6579），培养时间24-48小时
• 选择性富集：缓冲蛋白胨水（BPW）使用，pH范围6.8-7.2
• 快速免疫检测：胶体金法灵敏度≥95%，特异性≥98%

• 平板接种：XLD培养基选择性生长（沙门氏菌菌落呈黑色中心）
• 生化预试验：三糖铁琼脂（TSI）斜面反应（产酸/产气观察）
• 增菌液检测：Rappaport-Vassiliadis肉汤（RV）富集效果≥90%

• API20E测试：生化反应卡（≥95%准确率，参照FDABAM）
• 糖发酵试验：乳糖不发酵（阴性标准），葡萄糖发酵阳性
• 氧化酶测试：氧化酶阴性（反应时间≤30秒）

• O抗原凝集：多价抗血清分型（覆盖A-Z群），阳性率≥98%
• H抗原鞭毛测试：相位变异检测（灵敏度≥95%）
• Vi抗原筛查：伤寒沙门氏菌特异性（检出限≤10CFU/mL）

• PCR扩增：invA基因靶点（扩增效率≥99.5%，循环数35-40）
• 实时荧光PCR：TaqMan探针特异性≥99.9%（Ct值≤35）
• 基因测序：16SrRNA序列分析（覆盖率≥99%，参照ISO/TS13136）

• 内毒素测试：LAL法检测限≤0.01EU/mL
• 肠毒素筛选：ELISA法灵敏度≥90pg/mL
• 细胞毒性试验：Vero细胞模型（杀伤率≥80%）

• 药敏试验：Kirby-Bauer法（抑菌圈直径≥15mm）
• MIC测定：微量肉汤稀释法（浓度梯度0.25-256μg/mL）
• ESBL筛查：头孢噻肟耐药性（折点≥2μg/mL）

• 温度耐受：生长范围10-45°C（最适37°C）
• pH耐受：存活pH4.0-9.0（参照ISO11133）
• 盐度测试：NaCl耐受≤8%（存活率≥90%）

• 脂肪干扰消除：硅胶柱净化（回收率≥85%）
• 蛋白质屏蔽：蛋白酶K处理（抑制率≤5%）
• 色素干扰：光谱过滤（吸光度≤0.05）

• 阳性对照：ATCC14028株使用（浓度10^6CFU/mL）
• 阴性对照：大肠杆菌O157抑制（检出限≤0.1%）
• 重复性验证：变异系数CV≤5%（三次平行测试）

检测范围

1.生鲜肉类：包括猪肉、牛肉和禽肉，重点检测屠宰后表面污染和深层组织渗透率

2.蛋及蛋制品：涵盖鲜蛋、液蛋和蛋粉，侧重蛋壳裂缝污染和内溶物沙门氏菌检出

3.乳制品：涉及牛奶、奶酪和酸奶，检测重点为巴氏杀菌耐受性和脂肪层隐藏病原体

4.水产品：包括海鲜、鱼虾和贝类，关注海水盐度影响和冷冻储存存活率

5.果蔬类：涵盖沙拉蔬菜和新鲜水果，重点检测灌溉水残留和表面生物膜形成

6.加工食品：涉及熟食、罐头和速冻产品，侧重热处理后复苏能力和添加剂干扰

7.饮用水源：包括自来水、井水和瓶装水，检测重点为低浓度富集和氯消毒耐受

8.动物饲料：涵盖禽畜饲料和宠物粮，关注原料交叉污染和颗粒吸附效应

9.食品接触材料：涉及包装塑料、金属容器和橡胶，侧重表面生物负载和迁移测试

10.临床样本：包括粪便、血液和尿液，检测重点为快速诊断和高背景干扰消除

检测方法

国际标准：

• ISO6579:2017食品链微生物学沙门氏菌检测方法
• FDABAMChapter5食源性病原体沙门氏菌分离和鉴定
• AOAC2003.09免疫磁珠分离法检测食品中沙门氏菌

• GB4789.4-2016食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验
• SN/T1870-2016出口食品沙门氏菌检测方法PCR法
• GB/T5750.12-2006生活饮用水标准检验方法微生物指标

检测设备

1.恒温培养箱：MemmertIPP110型（温度范围20-65°C，精度±0.2°C）

2.PCR扩增仪：Bio-RadC1000型（热循环速度5°C/秒，孔数96）

3.酶标仪：TecanInfiniteF200型（波长范围200-1000nm，分辨率0.001OD）

4.生物安全柜：ESCOAirstreamAC2-4S1型（风速0.5m/s，HEPA过滤率99.995%）

5.离心机：Eppendorf5430R型（转速15000rpm，容量24×1.5mL）

6.显微镜：OlympusCX43型（放大倍数40-1000×，LED光源）

7.自动化接种仪：CopanWASP型（样品通量200/小时，精度±2μL）

8.荧光定量PCR仪：AppliedBiosystems7500型（Ct值检测精度±0.1，通道数5）

9.凝胶成像系统：Bio-RadChemiDocMP型（像素500万，灵敏度0.1pgDNA）

10.恒温摇床：InforsHTMinitron型（振荡频率50-300rpm，容量100mL×24）

11.紫外分光光度计：ShimadzuUV-2600型（波长精度±0.1nm，扫描速度100nm/min）

12.电泳仪：Bio-RadPowerPacBasic型（电压范围10-300V，电流400mA）

13.菌落计数器：ProtoCOL3型（计数精度±1%，图像分辨率5μm）

14.免疫磁珠分离器：DynabeadsMPC-S型（磁力强度1.5T，捕获效率≥95%）

15.冷冻干燥机：ChristAlpha1-4型（真空度0.01mbar，温度-55°C）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"沙门氏菌筛查"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。