检测项目
自由基清除分析:
- DPPH自由基清除率:半抑制浓度(IC50值)、清除率百分比(参照GB/T 5009.227-2016)
- ABTS自由基清除率:TEAC值(Trolox当量抗氧化能力≥0.5μmol/g)
- 羟基自由基清除率:清除率(%),荧光衰减速率
- FRAP法:铁离子还原力(μmol Fe²⁺/g,参照ISO 10927:2018)
- ORAC法:氧自由基吸收能力(荧光衰减率≥80%)
- CUPRAC法:铜离子还原力(吸光度值ΔA)
- SOD活性:超氧化物歧化酶活力(U/mg蛋白,参照GB/T 34796-2017)
- CAT活性:过氧化氢酶活力(k/min/mg)
- GPx活性:谷胱甘肽过氧化物酶活力(nmol/min/mL)
- MDA含量:丙二醛浓度(μmol/g,硫代巴比妥酸法)
- 脂质氢过氧化物:过氧化值(POV,meq/kg)
- 共轭二烯:吸光度234nm值
- 铁离子螯合率:螯合率(%),Fe²⁺浓度变化
- 铜离子螯合率:螯合率(%),参照ASTM EXXX)
- 还原电位:mV值(范围-200至+200mV)
- 氧化电位:mV值(精度±5mV)
- ROS检测:活性氧物种浓度(μM,荧光探针法)
- 氮自由基清除:NO清除率(%)
- GSH/GSSG比值:还原型谷胱甘肽比例(≥2.0)
- 蛋白羰基含量:羰基化蛋白浓度(nmol/mg)
- 热稳定性:抗氧化活性保留率(% after 80°C)
- 光稳定性:UV照射后活性变化(Δ值)
- 抗氧化指数:综合评分(0-100分)
- 当量浓度:Trolox或抗坏血酸当量(μmol/g)
检测范围
1. 水果蔬菜样品: 涵盖苹果、蓝莓等新鲜农产物,检测重点为多酚类和维生素C抗氧化效能
2. 药品制剂: 抗氧化补充剂如维生素E胶囊,侧重活性成分稳定性和生物利用度
3. 化妆品原料: 包括精油及植物提取物,检测重点为自由基清除率和光保护作用
4. 生物流体样本: 血清、血浆等,聚焦氧化应激标志物如MDA和SOD活性
5. 食用油及油脂: 橄榄油、鱼油等,检测脂质过氧化抑制和酸败延缓能力
6. 功能性食品: 茶饮料、谷物制品,评估总抗氧化能力和货架期预测
7. 植物提取物: 如绿茶多酚、姜黄素,侧重自由基清除和金属螯合性能
8. 环境污染物: 水质或土壤样本,检测抗氧化剂对氧化损伤的缓解作用
9. 细胞培养物: 体外细胞模型,重点为ROS生成抑制和细胞保护率
10. 工业添加剂: 防腐剂及抗氧化剂,测试热稳定性及协同效应
检测方法
国际标准:
- ISO 10927:2018 抗氧化活性测定指南(涵盖FRAP和ORAC法)
- ASTM EXXX-202X 自由基清除试验标准方法(DPPH和ABTS协议)
- AOAC 2012.10 ORAC法氧自由基吸收能力测定
- IUPAC 技术报告脂质过氧化分析方法
- GB/T 5009.227-2016 食品中DPPH自由基清除率测定
- GB/T 34796-2017 超氧化物歧化酶活性测定方法
- GB/T XXXX.XX-202X 总抗氧化能力FRAP法测定标准
- GB/T 5538-2005 油脂过氧化值测定(与ISO差异在样品处理温度)
检测设备
1. 紫外-可见分光光度计: Shimadzu UV-2600型(波长范围190-1100nm,精度±0.5nm)
2. 荧光光谱仪: Hitachi F-7100型(激发波长200-750nm,检测限0.01μg/mL)
3. 高效液相色谱仪: Agilent 1260 Infinity II型(流速0.1-10mL/min,柱温控制±0.1°C)
4. 电子顺磁共振仪: Bruker EMXplus型(磁场强度0-1.5T,分辨率0.1G)
5. 生化分析仪: Beckman Coulter AU5800型(通量800测试/小时,精度±2%)
6. 恒温振荡器: Memmert INB500型(温度范围-10至100°C,震荡频率50-300rpm)
7. 离心机: Eppendorf 5430R型(转速100-15000rpm,容量24×1.5mL)
8. pH计: Mettler Toledo SevenExcellence型(测量范围0-14,精度±0.01)
9. 恒温水浴锅: Julabo F12型(温度稳定性±0.1°C,容量12L)
10. 冷冻干燥机: Christ Alpha 1-4LDplus型(冷阱温度-85°C,真空度0.01mbar)
11. 酶标仪: Thermo Multiskan GO型(波长范围340-850nm,孔板兼容96/384孔)
12. 电化学工作站: CHI760E型(电位范围±10V,电流分辨率1pA)
13. 旋转蒸发仪: Heidolph Hei-VAP型(蒸发速率50-250mL/h,温度控制至200°C)
14. 微量天平: Sartorius Cubis II型(称量范围0.001g-220g,精度0.01mg)
15. 氮吹仪: Organomation N-EVAP型(气体流量控制0-15L/min,温度至100°C)