菌株原始种子遗传稳定性测试

检测项目

形态学特性检测：

• 菌落形态：直径变异系数≤5%、边缘整齐度分级（参照ISO7218）
• 细胞形态：长宽比标准差（SD≤0.15μm）、芽孢形成率≥98%

• 代谢谱分析：碳源利用率偏差值（±2%）、产物得率波动（RSD≤3.5%）
• 抗生素抗性：MIC值偏移（±1个梯度，参照CLSIM07）

• 基因组稳定性：SNP发生率（<0.001/代）、INDEL频率检测（Illumina平台）
• 质粒保有率：≥99.8%（qPCR法，拷贝数CV≤4%）

• 目标蛋白产量：批间RSD≤6%（SDS-PAGE/WesternBlot）
• 酶活性稳定性：比活力波动（±5%，参照GB/T34798）

• 16SrRNA序列一致性：≥99.9%（blastn比对）
• rDNA拷贝数：变异系数CV≤2%

• 基因组指纹图谱：条带匹配度≥99%（EcoRI/HindIII酶切）
• 质粒酶切位点：特征条带缺失数=0

• 传代极限测试：≥50代遗传漂变（突变累积<0.5%）
• 冻存复苏影响：存活率≥95%（液氮冻存验证）

• 初级代谢物谱：PCA聚类距离（R²≥0.98）
• 次级产物谱：特征峰保留率≥99.5%（LC-MS）

• 甲基化水平：CpG岛甲基化差异（≤1%）
• 组蛋白修饰：H3K4me3富集度变化（±3%）

• 外毒素基因：表达量波动（±2log2FC）
• 生物被膜形成：OD590值偏差（±5%）

检测范围

1.细菌工程菌种子库：大肠杆菌BL21(DE3)等表达宿主，重点检测质粒丢失率及诱导表达稳定性

2.工业酵母原始种子：酿酒酵母CEN.PK系列，侧重发酵性能衰减与线粒体基因组稳定性

3.放线菌生产菌种：链霉菌属抗生素高产株，关注次级代谢基因簇完整性

4.乳酸菌发酵剂：嗜热链球菌/保加利亚乳杆菌复合菌种，验证共生关系稳定性

5.丝状真菌库：黑曲霉工业酶生产株，检测孢子萌发同步性与异核体形成率

6.重组疫苗株：减毒沙门氏菌载体，监控外源基因整合位点保守性

7.环境耐受菌种：极端微生物种子库，评估压力响应基因表达稳健性

8.基因编辑株：CRISPR-Cas9修饰菌株，验证脱靶效应发生率

9.专利保藏菌种：依据布达佩斯条约存证株，核查传代后表型一致性

10.模式微生物：枯草芽孢杆菌168标准株，进行基因组注释位点验证

检测方法

国际标准：

• ISO11737-1:2018生物负载定量测试
• EP5.6欧洲药典菌种稳定性指南
• USP<1117>微生物学检测指导原则
• OECDGD34转基因生物稳定性评估

• GB4789.43-2023微生物菌种稳定性检测
• GB/T38580-2020工业微生物菌种遗传稳定性评价
• YY/T1849-2023重组菌种质控规范
• SN/T4624-2016入境微生物菌剂检测规程

检测设备

1.全自动微生物鉴定系统：VITEK2Compact（鉴定速度8h/样本，数据库覆盖率≥95%）

2.高通量测序仪：IlluminaNovaSeq6000（通量6Tb/run，读长2×150bp）

3.数字PCR系统：QIAcuitydPCR（检测限0.001%，分区数26,000）

4.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（检测速率70,000细胞/秒，488nm激光器）

5.显微成像平台：NikonEclipseTi2（分辨率2048×2048px，Z轴步进10nm）

6.恒温恒湿培养箱：MemmertIPP110（温度范围-10~70℃±0.1℃，湿度控制±1%）

7.全波长酶标仪：TecanInfiniteM200（波长范围230-1000nm，OD精度±0.01）

8.脉冲场电泳系统：CHEF-DRIII（电压梯度6V/cm，脉冲角度120°）

9.气相色谱质谱联用仪：Agilent8890/5977B（质量范围1.6-1050m/z，扫描速率20,000amu/sec）

10.冷冻干燥机：ChristAlpha2-4LDplus（极限真空0.001mbar，冷凝器-85℃）

11.自动化电穿孔仪：BTXECM830（电压范围50-3000V，脉冲宽度10μs-100ms）

12.生物反应器在线监测：EppendorfDASbox（DO测量范围0-600%±0.5%，pH精度±0.01）

13.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN（最大转速150,000rpm，RCF1,050,000×g）

14.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8（分辨率120nm，光谱检测范围400-850nm）

15.基因组稳定性分析软件：CLCGenomicsWorkbench（SNP检出限0.1%，嵌合体识别率≥99%）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"菌株原始种子遗传稳定性测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。