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蛋白质表达量分析

  • 原创官网
  • 2025-07-14 15:03:03
  • 关键字:北检研究院,蛋白质表达量分析

相关:

概述:蛋白质表达量分析通过生物化学技术精确测定生物样本中特定蛋白质的表达水平,核心检测对象包括目标蛋白的浓度、分子量和翻译后修饰状态。关键项目涵盖免疫测定(如ELISA和WesternBlotting)、色谱分离(HPLC)、光谱分析(UV-Vis)和质谱鉴定(LC-MS/MS)。这些方法应用于血清、细胞裂解液等样品,确保高灵敏度(检测限≤5pg/mL)和特异性,支持药物研发和临床诊断,遵循国际标准如ISO5725和国内标准GB/T27417-2017,保障数据可靠性和重现性。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

CMA/CNAS等证书详情,因时间等不可抗拒因素会发生变更,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

定量分析:

  • 蛋白质浓度:范围0.1-1000μg/mL(BCA法)
  • 表达水平:倍数变化≥2.0(参照ISO5725)
  • 相对丰度:CV值≤10%
免疫学检测:
  • ELISA:灵敏度≤5pg/mL、线性范围1-1000pg/mL(参照ISO15193)
  • WesternBlotting:条带强度量化、信噪比≥5:1
  • 免疫沉淀:结合效率≥95%
色谱分析:
  • HPLC纯度:≥95%(面积百分比)、保留时间偏差±0.1min
  • SEC分子量:kDa范围(10-250kDa)
  • IEX电荷异质性:主峰比例≥90%
光谱分析:
  • UV-Vis吸收峰:A280nm、消光系数≥1.0AU
  • 荧光检测:激发/发射波长(Ex280nm/Em340nm)
  • 圆二色谱:二级结构比例测定
质谱鉴定:
  • LC-MS/MS分子量:m/z比值精度±0.01Da
  • 翻译后修饰分析:磷酸化位点覆盖率≥85%
  • 肽段序列:匹配得分≥30(Mascot算法)
电泳分析:
  • SDS-PAGE分子量:分辨率≤5kDa
  • 2D-GE等电点:pI范围3-10
  • NativePAGE:天然结构完整性评估
细胞学分析:
  • 流式细胞术:表面蛋白表达率(MFI值)
  • 免疫细胞化学:染色强度量化、背景噪音≤5%
  • 细胞活性:活力≥90%
功能活性检测:
  • 酶动力学:Km值(单位mM)、Vmax(单位nmol/min)
  • 结合亲和力:Kd≤10nM
  • 抑制剂IC50:范围0.1-100μM
稳定性测试:
  • 热稳定性:Tm值(温度范围40-90°C)
  • 聚集评估:单体比例≥95%、粒径≤10nm
  • 冻融循环:回收率≥90%
交叉反应性:
  • 特异性测试:交叉反应性≤5%
  • 基质干扰:抑制率≤10%
  • 同源蛋白区分:差异≥50%

检测范围

1.血清样本:重点检测炎症标志物(如C-反应蛋白)和疾病诊断相关蛋白的浓度,确保高灵敏度和特异性。

2.细胞裂解液:评估培养细胞内蛋白质表达水平,侧重信号通路蛋白和转录因子的定量分析。

3.组织匀浆:分析活检样本中蛋白质谱,重点关注肿瘤标志物和组织特异性蛋白的表达差异。

4.重组蛋白:验证生物制药产品的纯度和身份,检测关键杂质如宿主细胞蛋白残留(≤100ppm)。

5.抗体药物:检测效价和杂质水平,侧重聚集物(≤5%)和片段分析。

6.尿液样本:监测肾损伤标志物(如白蛋白)的表达量,确保低丰度蛋白的检测限。

7.脑脊液:分析神经系统相关蛋白(如Tau蛋白),重点评估低浓度样本的准确性。

8.细胞培养上清:监控分泌蛋白(如细胞因子)的表达动态,侧重时间依赖丰度变化。

9.血浆样本:量化凝血因子和补体蛋白,检测抗凝剂干扰下的表达稳定性。

10.乳汁样本:评估营养蛋白(如乳清蛋白)的表达水平,关注热处理后的变性比例。

检测方法

国际标准:

  • ISO5725定量方法的准确度和精密度测定
  • ISO15193体外诊断医疗器械性能要求
  • ISO17025检测实验室通用技术要求
国家标准:
  • GB/T5009.124-2016食品中蛋白质测定方法
  • GB/T27417-2017定量分析方法验证指南
  • GB/T35809-2018蛋白质组学分析技术规范
(方法差异说明:ISO5725侧重于实验室间交叉验证的精密度要求,而GB/T27417更注重方法验证参数如检测限(LOD)和定量限(LOQ)的本地化标准;ISO15193强调诊断试剂的稳定性测试,GB/T5009.124优先考虑食品安全应用中的样品前处理差异。)

检测设备

1.微孔板读板仪:BioTekSynergyH1(检测波长范围:200-999nm)

2.分光光度计:ThermoScientificNanoDropOne(样品体积:0.5-2μL)

3.HPLC系统:Agilent1260InfinityII(流速范围:0.1-5mL/min)

4.质谱仪:WatersXevoTQ-S(分辨率:50,000)

5.电泳系统:Bio-RadMini-PROTEANTetra(凝胶尺寸:8x10cm)

6.流式细胞仪:BDFACSCelesta(激光数:4)

7.恒温摇床:EppendorfInnova44(温度范围:4-80°C)

8.离心机:Eppendorf5424R(最大离心力:21,130xg)

9.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone(搁板温度:-50°C)

10.成像系统:GEAmershamImager600(检测模式:化学发光)

11.pH计:MettlerToledoSevenExcellence(精度:±0.001)

12.分析天平:SartoriusQuintix(可读性:0.0001g)

13.恒温水浴:MemmertWB(温度精度:±0.1°C)

14.涡旋混合器:VWRAnalog(转速:0-3000rpm)

15.移液器:EppendorfResearchPlus(体积范围:0.1-5000μL)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"蛋白质表达量分析"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。