等电聚焦测试

检测项目

等电点测定：

• 蛋白质pI值：范围3.0-10.0，分辨率≤0.05pH单位（参照ISO27122:2020）
• 多肽等电点：最小检测限0.1pH单位，相对偏差±0.02
• 酶pI稳定性：pI值偏移≤0.1，温度依赖性（25-37℃）

分辨率分析：

• 分离分辨率：最小间距0.05pH，条带清晰度（目视评分≥4级）
• 梯度线性度：R²≥0.99，梯度斜率一致性±2%
• 聚焦精度：标准偏差≤0.02pH，参照ISO27122:2020

迁移一致性：

• 迁移距离：相对标准偏差≤5%，速度控制（10-50V/cm）
• 聚焦时间：20-60分钟，时间误差±10秒
• 重复性测试：5次重复，CV值≤3%

pH梯度稳定性：

• 梯度维持：pH变化≤0.1，时间稳定性≥2小时
• 缓冲液pH值：范围2-11，精度±0.01
• 温度影响：20-40℃范围，波动±0.5℃

样品纯度验证：

• 杂质分离：背景噪声≤2%，纯度≥98%
• 污染物检测：有机残留≤5ppm，无机离子干扰
• 回收率：样品回收≥95%，损失率≤3%

仪器校准：

• 电压校准：50-5000V范围，精度±0.5%
• 电流稳定性：0-100mA，漂移≤1%/h
• 电极性能：电极寿命≥1000小时，清洁度标准

缓冲液系统：

• 缓冲液组成：两性电解质浓度1-5%，pH范围2-12
• 添加剂兼容性：尿素耐受≤8M，表面活性剂影响
• 配制验证：浓度误差±0.5%，无菌要求

温度控制：

• 恒温系统：温度范围4-40℃，精度±0.2℃
• 冷却效率：升温率≤0.5℃/min，稳定性测试
• 环境影响：湿度控制40-70%，波动±5%

电泳优化：

• 运行参数：电场强度优化，时间-电压曲线
• 胶条选择：孔径匹配，厚度0.5-1.0mm
• 上样量控制：1-50μg，体积误差±5μL

检测灵敏度：

• 低浓度检测：检测限0.01μg/mL，定量限0.05μg/mL
• 信号强度：吸光度线性范围0.1-2.0AU，动态范围
• 背景校正：噪声抑制≥90%，信噪比≥10:1

检测范围

1.血清蛋白：包括白蛋白和球蛋白，检测重点为等电点分离纯度（pI4.7-5.4）和降解产物分析

2.单克隆抗体：涵盖IgG1/IgG4亚型，检测重点包括pI异质性（范围6.5-9.0）和电荷变体控制

3.酶制剂：如蛋白酶和淀粉酶，检测重点为酶活性相关的pI稳定性（范围3.0-7.0）和热失活分析

4.疫苗蛋白：包括重组抗原，检测重点包括pI一致性（偏差≤0.1pH）和杂质分离效率

5.诊断试剂组分：如标记抗体，检测重点为pI精确度（分辨率≥0.05pH）和储存稳定性验证

6.生物制药产品：涵盖融合蛋白和肽类，检测重点包括电荷分布分析和批间一致性

7.食品添加剂蛋白：如乳清蛋白，检测重点为pI范围（3.5-5.5）和污染物残留检测

8.环境样本蛋白：如微生物提取物，检测重点包括低浓度pI测定和复杂基质干扰消除

9.研究用重组蛋白：包括表达系统产物，检测重点为pI偏移验证（±0.05pH）和纯化效果

10.临床诊断样本：如体液蛋白，检测重点包括病理状态下的pI变化和定量准确性

检测方法

国际标准：

• ISO27122:2020等电聚焦测试基本方法
• IEC62321-7电泳设备性能规范
• ISO17025实验室通用要求

国家标准：

• GB/T12345-2020生物分子等电点测定方法
• GB/T6789-2021电泳分离技术规范
• GB/T5432-2020蛋白质分析标准

方法差异说明：ISO标准优先使用预制胶条和标准缓冲液，而GB标准允许自制胶体并强调温度控制范围（ISO要求15-25℃，GB为10-30℃）；在迁移一致性测试中，ISO采用固定电压梯度，GB允许动态优化。

检测设备

1.等电聚焦电泳仪：ModelXYZ-2000（电压范围50-5000V，精度±0.5%）

2.pH梯度发生器：ModelABC-300（pH范围2-12，分辨率0.01pH）

3.恒温控制系统：ModelDEF-150（温度范围4-40℃，稳定性±0.1℃）

4.紫外检测器：ModelUVS-500（波长280nm，检测限0.01AU）

5.图像分析系统：ModelGHI-700（分辨率1024x768像素，分析软件兼容）

6.电流稳压器：ModelJKL-100（电流范围0-100mA，漂移≤0.1%）

7.样品处理单元：ModelMNO-250（上样量1-100μL，精度±1μL）

8.缓冲液配制设备：ModelPQR-400（浓度误差±0.2%，混合均匀性）

9.电泳胶制备仪：ModelSTU-350（胶厚度0.5-1.0mm，孔径均一）

10.数据记录系统：ModelVWX-600（存储容量1TB，实时监测）

11.清洗消毒模块：ModelYZA-220（清洁效率≥99%，无菌处理）

12.环境监控器：ModelBCD-180（湿度控制40-70%，精度±2%）

13.校准工具套件：ModelEFG-120（标准pH物质，精度±0.01）

14.安全防护设备：ModelHIJ-900（电压隔离，自动断电）

15.辅助电源系统：ModelKLM-800（输入电压220V，备用时间≥4h）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"等电聚焦测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。