检测项目
光合色素分析:
- 叶绿素含量:叶绿素a/b比值(参照GB/T30392-2013)、总叶绿素浓度(mg/gFW)
- 类胡萝卜素检测:β-胡萝卜素(≥80%纯度)、叶黄素(HPLC定量限0.01μg/mL)
- 可溶性糖:蔗糖(酶法检测限0.1μmol/g)、葡萄糖/果糖(HPLC-ELSD法)
- 淀粉含量:直链/支链淀粉比例(碘比色法,GB/T22427.9-2008)
- 三羧酸循环产物:柠檬酸(IC法±2%RSD)、苹果酸(酶电极法)
- 次生有机酸:酒石酸(HPLC-MS/MS检测限5ng/g)
- 必需氨基酸:赖氨酸(OPA衍生法)、蛋氨酸(荧光检测)
- 非蛋白氨基酸:γ-氨基丁酸(GABA≥0.3mg/100g)
- 碳固定酶:RuBisCO活性(μmolCO2/min/mgprot,ISO10225:2020)
- 糖代谢酶:蔗糖磷酸合成酶(SPS,比活性≥0.5nkat/mg)
- 13C标记丰度:韧皮部汁液δ13C值(IRMS精度±0.1‰)
- 碳分配速率:果实库强(mgC/gDW·h)
- 光合效率:净光合速率Pn(μmolCO2/m²/s,LI-6400XT标准)
- 呼吸代谢:暗呼吸速率Rd(CO2释放量)
- 碳氮比:C/N(元素分析仪精度0.01%)
- 稳定同位素:δ15N(同位素质谱法)
- 多酚类:总黄酮(UV法510nm)、花青苷(pH示差法)
- 萜烯化合物:柠檬烯(GC-MS保留指数匹配)
- 生长素:IAA(ELISA法检测限1pg/mL)
- 糖信号激素:海藻糖-6-磷酸(T6P,LC-MS/MS)
检测范围
1.果树叶片:新梢功能叶与老叶对比分析,重点检测叶绿素荧光参数(Fv/Fm)及蔗糖合成酶活性
2.果实器官:发育期果实(幼果至成熟期),核心检测可溶性固形物(TSS)与苹果酸脱羧酶动态变化
3.韧皮部汁液:环剥取样获取筛管汁液,精准测定蔗糖浓度(15-25%w/v)及氨基酸组成
4.根系分泌物:根际土壤有机酸(草酸/柠檬酸)分泌量,碳分配占比检测
5.贮藏器官:块根/块茎(如苹果砧木),淀粉积累模式及磷酸化酶活性检测
6.花器官:花期花瓣蜜腺,重点分析果糖/葡萄糖比例及花蜜分泌速率
7.嫁接结合部:砧穗接合处维管组织,检测胼胝质沉积量与蔗糖转运蛋白表达
8.胁迫响应组织:干旱/盐胁迫下叶片,检测脯氨酸积累量及山梨醇代谢路径
9.转基因材料:光合基因改造株系,RuBisCO活化酶(RCA)过表达验证
10.产后贮藏产品:采收后果实,呼吸跃变期乙烯与可滴定酸(TA)关联分析
检测方法
国际标准:
- ISO10225:2020植物酶活性测定—RuBisCO羧化效率
- AOAC984.13植物组织中可溶性糖的高效阴离子色谱法
- EN16155:2012食品中苹果酸和柠檬酸的酶法测定
- ASTMD6866-22生物基产品碳同位素示踪标准
- DIN10779:2017蜂蜜及植物汁液中糖类的HPLC分析
- GB/T30392-2013植物中叶绿素含量的分光光度法
- GB/T22427.9-2008淀粉及其衍生物直链淀粉含量测定
- NY/T2742-2015水果及制品中可溶性糖的测定
- GB5009.124-2016食品中氨基酸的测定
- LY/T3249-2020植物组织碳氮元素分析技术规程
检测设备
1.光合作用测定系统:LI-6800B型(CO2控制精度±1μmol/mol,光强0-3000μmol/m²/s)
2.超高效液相色谱仪:WatersACQUITYUPLCH-Class(糖类分离柱BEHAmide2.1×150mm)
3.三重四极杆质谱:SCIEXQTRAP6500+(多酚检测MRM模式,动态范围>106)
4.全自动氨基酸分析仪:HitachiL-8900(茚三酮柱后衍生,分离度>1.5)
5.稳定同位素质谱仪:ThermoDeltaVAdvantage(δ13C精度0.03‰,EA联用)
6.酶标仪:BioTekSynergyH1(荧光检测灵敏度1fmolNADPH)
7.冷冻离心浓缩系统:ChristAlpha2-4LDplus(真空度<0.05mbar,-84℃捕集)
8.近红外光谱仪:BrukerMATRIX-F(果实糖度无损检测,波长12000-4000cm-1)
9.激光共聚焦显微镜:LeicaTCSSP8(叶绿体自发荧光检测,分辨率120nm)
10.植物生理监测系统:ICTInternationalPSY1(茎流计,分辨率0.001cm/h)