菌株原始种子抗生素抗性检测

检测项目

Beta-lactam类抗生素抗性：

• MIC测定：浓度范围0.125-256μg/mL（参照CLSIM07）
• 抑菌圈直径：直径≥20mm为敏感（参照ISO20776-1）
• 抗性基因检测：blaCTX-M变异分析（灵敏度0.1pgDNA）

Aminoglycoside类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.25-128μg/mL（参照CLSIM100）
• 抗性基因检测：aac(6')-Ib定量（阈值Ct≤30）
• 扩散法验证：抑菌圈≥15mm（参照ISO20776-1）

Quinolone类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.06-64μg/mL（参照CLSIM07）
• gyrA突变检测：PCR扩增效率≥95%（参照ISO22174）
• 耐药表型分析：生长抑制率≤50%

Macrolide类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.12-64μg/mL（参照CLSIM100）
• erm基因检测：实时荧光PCR（检测限0.01copies/μL）
• 抑菌圈阈值：直径≥18mm（参照ISO20776-1）

Tetracycline类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.25-128μg/mL（参照CLSIM07）
• tet基因检测：PCR-RFLP分型（分辨率100bp）
• 多重抗性指数：MDR≥3（参照CLSIM39）

Sulfonamide类抗生素抗性：

• MIC测定：范围4-512μg/mL（参照CLSIM100）
• sul基因检测：实时PCR（扩增效率90-110%）
• 扩散法标准：抑菌圈≥17mm（参照ISO20776-1）

Glycopeptide类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.5-256μg/mL（参照CLSIM07）
• van基因检测：多重PCR（特异性98%）
• 菌株存活率：暴露后存活≥80%

Carbapenem类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.25-128μg/mL（参照CLSIM100）
• KPC/NDM基因检测：实时荧光PCR（灵敏度≤10copies）
• 协同试验：抑菌圈差值≥5mm（参照ISO20776-1）

Polymyxin类抗生素抗性：

• MIC测定：范围0.25-64μg/mL（参照CLSIM07）
• mcr基因检测：PCR-Sanger测序（准确率99.9%）
• 耐药表型验证：生长密度OD600≥0.5

多重抗性综合检测：

• 抗性谱分析：覆盖率≥95%（参照CLSIM39）
• 基因型-表型关联：一致性≥90%
• 耐药指数计算：RD值≤0.5（参照ISO20776-1）

检测范围

1.临床细菌分离株：涵盖金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等，重点检测Beta-lactam和Carbapenem类抗性。

2.环境微生物菌株：来自土壤或水体，侧重多重耐药基因如mcr和NDM评估。

3.工业发酵菌株：用于抗生素生产，确保无bla或van基因污染。

4.食品病原体菌株：如沙门氏菌，监控Quinolone和Sulfonamide抗性食品安全风险。

5.兽医临床菌株：动物病原体如肺炎克雷伯菌，评估跨种传播能力。

6.益生菌菌株：商业益生菌，检测erm或tet基因转移潜力。

7.海洋微生物菌株：海水样本，侧重Polymyxin抗性新兴基因研究。

8.真菌菌株：念珠菌等，抗真菌药物如Azole类MIC测定。

9.古菌菌株：极端环境微生物，评估Glycopeptide抗性特性。

10.基因工程菌株：重组微生物，验证抗性基因修饰后稳定性。

检测方法

国际标准：

• CLSIM07稀释法MIC测定（肉汤微量稀释）
• ISO20776-1扩散法抑菌圈测量（纸片法）
• ISO22174PCR检测方法（引物特异性要求）
• CLSIM100药敏试验解释标准（折点定义）
• ISO20776-2Etest法MIC测定（梯度浓度验证）

国家标准：

• GB/T4789.28微生物药敏试验方法（琼脂稀释法）
• GB/T14926.64细菌抗性基因检测（PCR标准）
• GB/T5750.12水质微生物抗性评估（扩散法变体）
• GB/T13093食品微生物检测（MIC测定规范）
• GB/T18448.7动物病原体药敏试验（协同试验差异）

方法差异说明：国际标准CLSIM07使用Mueller-Hinton肉汤，而国家标准GB/T4789.28优先使用琼脂基础培养基；ISO20776-1扩散法要求特定培养时间（16-18小时），GB/T14926.64允许24小时培养；CLSIM100折点基于欧美流行病学数据，GB标准参考本土耐药谱调整阈值。

检测设备

1.自动微生物培养系统：MODELABC123（温度控制20-45°C，精度±0.1°C）

2.实时荧光PCR仪：MODELXYZ456（热循环精度±0.2°C，检测通道4个）

3.显微镜：MODELDEF789（放大倍数1000x，相位对比功能）

4.离心机：MODELGHI012（转速范围500-15000rpm，容量50mL）

5.分光光度计：MODELJKL345（波长范围200-800nm，分辨率0.1nm）

6.自动稀释系统：MODELMNO678（稀释精度±1%，体积范围1-1000μL）

7.电泳仪：MODELPQR901（电压范围50-300V，凝胶尺寸10cm）

8.培养箱：MODELSTU234（湿度控制30-95%，温度均匀性±0.5°C）

9.生物安全柜：MODELVWX567（气流速度0.5m/s，HEPA过滤效率99.99%）

10.液氮罐：MODELYZA890（容量50L，保存温度-196°C）

11.振荡器：MODELBCD123（转速50-300rpm，振幅25mm）

12.pH计：MODELEFG456（测量范围0-14，精度±0.01）

13.天平：MODELHIJ789（量程0.001g-500g，精度0.0001g）

14.冷冻干燥机：MODELKLM012（真空度0.01mbar，温度-50°C）

15.自动抑菌圈测量仪：MODELNOP345（分辨率0.01mm，扫描速度10s/样本）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"菌株原始种子抗生素抗性检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。