增殖能力分析

检测项目

细胞活力测定：

• MTT吸光度值：吸光度范围0.1-3.0（参照ISO10993-5）
• LDH释放率：释放率≤5%（参照ASTMF813-07）
• 台盼蓝排斥率：活细胞率≥95%（参照GB/T16886.5-2017）

增殖速率分析：

• 增殖指数（PI）：PI值1.2-2.5（参照ISO20391-1:2018）
• 细胞倍增时间：时间范围18-48小时（参照ASTME2523-13）

DNA合成检测：

• BrdU掺入率：阳性率10-50%（参照ISO13485:2016）
• EdU标记指数：指数值0.3-0.8（参照GB/T39765-2021）

克隆形成能力：

• 克隆形成率：形成率≥20%（参照ASTME2450-19）
• 平均克隆直径：直径≥50μm（参照GB/T16886.12-2017）

细胞周期分析：

• G1/S期比率：比率1.5-2.5（参照ISO20391-2:2019）
• S期分数：分数值15-30%（参照GB/T33778-2017）

凋亡相关检测：

• AnnexinV阳性率：阳性率≤10%（参照ASTMF1980-21）
• Caspase-3活性：活性值≤2U/mL（参照ISO10993-12:2021）

迁移侵袭分析：

• 伤口愈合率：愈合率≥80%/24h（参照GB/T38792-2020）
• Transwell侵袭计数：细胞数≥100/孔（参照ASTME2526-13）

干细胞增殖评估：

• 集落形成单位（CFU）：CFU≥50（参照ISO13022:2012）
• 自我更新能力评分：评分≥7（参照GB/T33216-2016）

信号通路活性：

• 磷酸化蛋白表达水平：表达倍数1.5-3.0（参照ASTME3072-19）
• 激酶活性单位：活性≥50U/mg（参照ISO17025:2017）

基因表达影响：

• 增殖基因mRNA表达量：表达量FC1.2-2.0（参照GB/T34796-2017）
• 蛋白水平检测：浓度≥5ng/mL（参照ASTME3134-20）

检测范围

1.肿瘤细胞系：涵盖HeLa、MCF-7等常见系，检测重点为化疗药物敏感性和增殖抑制率

2.原代细胞：如成纤维细胞、肝细胞，检测培养条件优化下的活力维持和增殖动力学

3.干细胞：包括间充质干细胞、胚胎干细胞，检测分化潜能相关增殖效率和自我更新能力

4.组织切片：如肿瘤组织、正常组织，检测原位增殖标志物表达和病理增殖异常

5.生物材料负载细胞：如支架材料上细胞生长，检测细胞附着率、增殖速率和材料兼容性

6.药物筛选模型：如3D培养系统，检测药物对增殖的剂量依赖性抑制效应

7.免疫细胞：如T细胞、NK细胞，检测激活状态下增殖能力和细胞因子响应

8.植物细胞：如愈伤组织，检测激素诱导的增殖率和形态变化

9.微生物细胞：如细菌、酵母，检测生长曲线和倍增时间在优化条件下的稳定性

10.临床样本：如血液样本、活检样本，检测疾病状态下的增殖异常和诊断指标

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价体外细胞毒性试验
• ASTME2523-13细胞增殖体外试验的标准指南
• ISO20391-1:2018细胞计数方法验证的一般要求和指南
• ASTMF1980-21医疗设备用材料无菌屏障系统加速老化标准指南

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验
• GB/T39765-2021细胞培养技术规范
• GB/T34796-2017定量聚合酶链反应检测基因表达方法
• GB/T33216-2016干细胞制剂制备与质量控制规范

（方法差异包括：ISO标准侧重细胞毒性终点检测，ASTM强调增殖动力学参数；GB标准采用更低试剂浓度和室温控制，而国际标准指定37°C恒温；DNA合成检测中，ISO要求BrdU孵育时间24小时，GB标准为18小时）

检测设备

1.倒置显微镜：OlympusIX83型（放大倍数40-1000X，分辨率0.2μm）

2.流式细胞仪：BDFACSCantoII型（检测通道8个，流速12μL/min）

3.酶标仪：BioTekSynergyH1型（波长范围200-1000nm，精度±0.01OD）

4.离心机：Eppendorf5424R型（转速14000rpm，温度控制-10-40°C）

5.CO2培养箱：ThermoScientificHeracell150i型（CO2浓度5%，湿度控制±1%）

6.实时PCR仪：AppliedBiosystems7500型（热循环精度±0.1°C，检测通道5个）

7.自动细胞计数仪：CountessIIFL型（检测范围10^3-10^7cells/mL，误差≤2%）

8.电穿孔系统：Bio-RadGenePulserXcell型（电压范围50-3000V，脉冲宽度10-100ms）

9.冷冻切片机：LeicaCM1950型（切片厚度1-100μm，温度控制-30°C）

10.生物反应器：SartoriusBiostatB型（体积控制±1%，pH监测范围4-9）

11.紫外可见分光光度计：ThermoNanoDrop2000型（样品体积1-2μL，波长精度±1nm）

12.实时细胞分析系统：ACEAxCELLigence型（阻抗检测频率10kHz-10MHz，孔板规格96孔）

13.微孔板洗涤器：BioTekELx405型（清洗效率>99%，流速可调0-500μL/s）

14.离心蒸发仪：LabconcoCentriVap型（真空度<1mbar，温度范围室温-60°C）

15.高内涵成像系统：PerkinElmerOperettaCLS型（分辨率0.65μm，通道数4个）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"增殖能力分析"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。