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酵母菌应激响应分析

  • 原创官网
  • 2025-07-17 09:22:30
  • 关键字:北检研究院,酵母菌应激响应分析

相关:

概述:酵母菌应激响应分析专注于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)在环境胁迫下的分子和细胞水平变化检测。核心检测对象包括活性氧(ROS)水平、热休克蛋白(HSP)表达及细胞存活率。关键项目涵盖氧化应激、热休克响应、渗透压耐受性、DNA损伤修复、代谢物变化、转录因子活性、细胞周期调控、膜完整性、抗氧化酶活性及应激信号通路分析,采用荧光探针、Western blot和流式细胞术等技术评估胁迫诱导的生物标志物变化。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

氧化应激响应:

  • 活性氧水平检测:ROS浓度(单位:μmol/mgprotein)、氧化损伤产物(8-OHdG含量,参照ISO21427)
  • 抗氧化酶活性:超氧化物歧化酶(SOD活性,U/mgprotein)、过氧化氢酶(CAT活性,≥50U/mg)
热休克响应:
  • 热休克蛋白表达:HSP70水平(foldchangevscontrol)、HSP90定量(浓度≥2.5ng/μL)
  • 细胞热耐受性:热休克存活率(%)、热诱导蛋白聚集度
渗透压应激响应:
  • 渗透调节物质:甘油积累量(mmol/gDW)、脯氨酸含量(μg/mgprotein)
  • 细胞形态变化:细胞体积变化率(%)、渗透压耐受指数
DNA损伤响应:
  • DNA断裂检测:彗星尾矩(arbitraryunits)、γ-H2AX焦点计数
  • 修复酶活性:PARP酶活性(U/mg)、碱基切除修复效率
代谢组学分析:
  • 代谢物谱:ATP/ADP比率、乳酸含量(mmol/L)
  • 能量代谢变化:糖酵解通量(μmol/min/mg)、TCA循环中间体
转录组学分析:
  • 基因表达:应激基因mRNA水平(foldchange)、转录因子结合活性
  • RNA稳定性:半衰期测定(min)、降解速率
细胞活力检测:
  • 细胞存活率:台盼蓝排斥率(%)、CFU计数
  • 凋亡指数:caspase-3活性(RFU)、磷脂酰丝氨酸外翻
细胞周期分析:
  • 周期分布:G1/S/G2-M期比例(%)、有丝分裂指数
  • 周期调控蛋白:cyclinB1水平(ng/μL)、CDK活性
膜完整性检测:
  • 膜通透性:PI染色阳性率(%)、膜电位变化
  • 脂质组成:磷脂酰胆碱含量(μg/mg)、不饱和脂肪酸比例
应激信号通路分析:
  • 信号分子:MAPK磷酸化水平、cAMP浓度(pmol/mg)
  • 通路激活:NF-κB转位效率、应激响应因子结合

检测范围

1.酿酒酵母标准实验室菌株:包括BY4741等模型菌株,检测重点为基本应激响应机制及基础参数变化

2.工业发酵酵母菌株:如乙醇生产菌株,侧重高渗和热应激下的代谢适应性及产物耐受性

3.基因敲除酵母菌株:涉及SOD1或HSP104缺失突变体,检测重点为特定基因功能缺失对响应的影响

4.对数生长期酵母培养物:处于指数生长期的细胞,检测重点为快速应激响应及细胞周期同步性

5.氧化应激处理样品:H2O2或menadione处理样品,侧重ROS累积及抗氧化防御系统评估

6.热应激处理样品:42°C热休克处理细胞,检测重点为热休克蛋白表达及热耐受性恢复

7.高渗应激处理样品:高盐或高糖环境培养物,检测重点为渗透调节物质积累及膜稳定性

8.低pH应激处理样品:pH3.0酸性条件处理,检测重点为质子泵活性及细胞存活机制

9.营养饥饿应激样品:碳源或氮源限制培养,检测重点为自噬诱导及能量代谢重编程

10.药物诱导应激样品:如抗生素或化疗剂处理,检测重点为DNA损伤响应及耐药性机制

检测方法

国际标准:

  • ISO21571:2018微生物应激响应分子检测方法(包含荧光探针定量)
  • ISO22196:2011细胞活力与凋亡测定(规定台盼蓝染色参数)
  • ISO10993-5:2009体外细胞毒性测试(用于应激诱导损伤评估)
国家标准:
  • GB/T4789.28-2021食品微生物检测通则(涵盖酵母应激响应参数)
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价(用于细胞膜完整性测试)
  • GB/T27405-2021实验室质量控制规范(规定代谢物分析流程)
国际标准采用μmol单位体系而国家标准使用mmol体系,国际标准要求更高分辨率设备

检测设备

1.流式细胞仪:BDFACSCantoII型(检测通道数:8,流速范围:1-1000μL/min)

2.荧光显微镜:OlympusIX83型(分辨率:0.2μm,荧光滤光片:6波段)

3.实时荧光定量PCR仪:Bio-RadCFX96型(温控精度:±0.1°C,通量:96孔)

4.酶标仪:ThermoMultiskanSkyHigh型(波长范围:200-1000nm,精度:±1%)

5.高速离心机:Eppendorf5430R型(最大转速:15000rpm,容量:24×1.5mL)

6.恒温培养箱:MemmertIN110型(温度范围:5-70°C,波动:±0.5°C)

7.电泳系统:Bio-RadMini-PROTEAN型(电压范围:10-300V,凝胶尺寸:8×10cm)

8.质谱仪:ThermoQExactive型(质量精度:<1ppm,扫描速度:12Hz)

9.核磁共振仪:BrukerAvanceIII型(磁场强度:600MHz,分辨率:0.01ppm)

10.生物反应器:SartoriusBiostatB型(容积:5L,控制参数:pH/DO/温度)

11.超低温冰箱:ThermoScientificForma型(温度范围:-86°C,容量:700L)

12.分光光度计:ShimadzuUV-2600型(波长精度:±0.3nm,带宽:1nm)

13.细胞计数器:Bio-RadTC20型(计数范围:10^4-10^7cells/mL,精度:±2%)

14.微量加样器:EppendorfResearch型(体积范围:0.1-1000μL,误差:≤1%)

15.恒温摇床:INFORSHTMinitron型(转速范围:20-300rpm,温度控制:±0.1°C)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"酵母菌应激响应分析"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。