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葡农药多菌灵ELISA快速筛查法开发验证实验

  • 原创官网
  • 2025-07-17 17:46:30
  • 关键字:北检研究院,葡农药多菌灵ELISA快速筛查法开发验证实验

相关:

概述:本研究针对葡萄中多菌灵农药残留,开发基于酶联免疫吸附测定(ELISA)的快速筛查方法。核心检测对象为多菌灵(Carbendazim),通过优化抗原-抗体反应体系,验证方法的关键性能参数,包括检测限、特异性、回收率和精密度。实验覆盖样品前处理、ELISA板包被及数据分析环节,确保方法在农产品安全检测中的可靠性和实用性。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

方法开发参数:

  • 检测限(LOD):≤0.01mg/kg(参照GB2763-2021)
  • 线性范围:0.01-1.0mg/kg(相关系数R²≥0.99)
  • 包被浓度:抗原稀释比1:1000(优化至OD值0.8-1.2)
特异性验证:
  • 交叉反应率:对多菌灵类似物≤5%(如苯菌灵、甲基硫菌灵)
  • 基质干扰:葡萄汁中干扰因子≤10%(参照ISO5725-6)
精密度评估:
  • 批内精密度:RSD≤5%(n=6)
  • 批间精密度:RSD≤10%(n=3批)
准确度验证:
  • 回收率:85%-115%(添加浓度0.05-0.5mg/kg)
  • 偏差值:±10%(对比HPLC法)
稳定性测试:
  • 试剂稳定性:4℃储存≥6个月(活性损失≤15%)
  • 板间稳定性:CV≤8%(重复测试3次)
灵敏度优化:
  • IC50值:0.05mg/kg(优化抗体亲和力)
  • 信号背景比:≥3:1(参照EN15662)
样品前处理:
  • 提取效率:≥90%(使用乙腈提取)
  • 净化步骤:C18柱回收率≥85%
数据分析:
  • 曲线拟合:四参数逻辑模型(R²≥0.98)
  • 假阳性率:≤2%(n=50样本)
环境适应性:
  • 温度影响:25±2℃下性能稳定(OD变化≤5%)
  • pH耐受:范围6.0-8.0(最佳7.4)
方法转移性:
  • 实验室间验证:RSD≤12%(3家实验室比对)
  • 设备兼容性:适配主流ELISA阅读器(CV≤8%)

检测范围

1.葡萄果实:鲜食葡萄及酿酒葡萄,重点检测果皮和果肉残留,消除基质色素干扰。

2.葡萄酒产品:红葡萄酒和白葡萄酒,侧重酒精含量对ELISA信号的影响及前处理优化。

3.葡萄果汁:浓缩汁及复原汁,检测重点为糖分和酸度对回收率的干扰控制。

4.葡萄干制品:干制葡萄及蜜饯,关注水分含量对提取效率的影响及残留稳定性。

5.葡萄叶样本:鲜叶及加工叶,检测重点为叶绿素干扰的消除及低浓度残留筛查。

6.土壤基质:葡萄园土壤,侧重有机质对多菌灵吸附效应的校正。

7.灌溉用水:葡萄种植区水源,检测重点为水溶性干扰物的去除及低浓度检测限验证。

8.发酵副产物:酒糟及果渣,关注高固形物含量对ELISA板包被的影响。

9.包装材料:葡萄储运用塑料及纸箱,检测迁移残留及表面污染控制。

10.生物样本:葡萄植株根茎,重点检测内吸性残留及组织均质化处理。

检测方法

国际标准:

  • ISO5725-6:1994精密度数据的统计方法(用于RSD计算)
  • EN15662:2018食品中农药残留测定(基质效应校正差异)
  • AOACOfficialMethod2007.01免疫测定法验证指南(对比HPLC方法)
国家标准:
  • GB2763-2021食品中农药最大残留限量(检测限要求差异)
  • GB/T20769-2008水果蔬菜中农药残留测定(前处理步骤差异)
  • GB/T27404-2008实验室质量控制规范(精密度验证差异)

检测设备

1.微孔板阅读器:BioTekSynergyH1型(波长范围450-650nm,精度±0.005OD)

2.ELISA试剂盒:多菌灵专用试剂盒(包被抗原浓度1mg/mL,灵敏度0.01mg/kg)

3.恒温孵育器:MemmertINC108型(温度范围4-60℃,稳定性±0.5℃)

4.离心机:Eppendorf5430R型(转速100-15000rpm,容量24×1.5mL)

5.振荡器:IKAMS3型(振幅0-25mm,频率300-1500rpm)

6.移液器:EppendorfResearchplus型(量程0.1-1000μL,精度±0.5%)

7.纯水系统:MilliporeMilli-Q型(电阻率18.2MΩ·cm,TOC≤5ppb)

8.分析天平:SartoriusCPA225D型(量程0-220g,精度±0.01mg)

9.样品均质器:IKAT25型(转速300-25000rpm,处理量0.5-100mL)

10.固相萃取装置:SupelcoVisiprepDL型(流速0.1-10mL/min,压力范围0-100psi)

11.冷冻干燥机:ChristAlpha1-2LDplus型(温度-50℃至40℃,真空度0.01mbar)

12.pH计:MettlerToledoSevenCompact型(范围0-14,精度±0.01)

13.恒温水浴:JulaboSW22型(温度范围-20-150℃,稳定性±0.1℃)

14.光谱仪:ShimadzuUV-1800型(波长190-1100nm,分辨率0.1nm)

15.数据记录系统:Gen5软件平台(曲线拟合算法,兼容四参数模型)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"葡农药多菌灵ELISA快速筛查法开发验证实验"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。