磁珠法核酸提取纯度验证测试

磁珠法核酸提取纯度验证测试聚焦核酸样本的浓度、纯度及杂质残留评估,确保下游应用可靠性。核心检测对象包括DNA/RNA浓度(紫外吸光度法A260值)、纯度(A260/A280比值标准范围1.8-2.0)、蛋白质残留(BCA法检测限≤10ng/μL)、盐分残留(电导率≤5mS/cm)及有机溶剂残留(GC-MS法乙醇≤0.1%)。测试依据ISO和GB标准,使用分光光度计、PCR仪等高精度设备,覆盖血液、组织等多样本类型。

原创阅读 82025-07-25工程师CMACNASISO高新技术企业

检测项目

核酸浓度检测:

  • 紫外吸光度法:A260值(参照ISO20395:2019)
  • 荧光定量法:浓度偏差±5%(参照GB/T37872-2019)
纯度检测:
  • A260/A280比值:标准范围1.8-2.0(参照ISO21571:2005)
  • A260/A230比值:≥1.8(参照GB/T37871-2019)
蛋白质残留检测:
  • BCA法:检测限≤10ng/μL(参照ISO20395:2019)
  • Bradford法:残留量≤5μg/mL(参照GB/T37871-2019)
盐分残留检测:
  • 电导率测试:≤5mS/cm(参照ISO21571:2005)
  • 离子色谱法:钠离子≤10ppm(参照GB/T37872-2019)
有机溶剂残留检测:
  • GC-MS法:乙醇残留≤0.1%(参照ISO21571:2005)
  • HPLC法:异丙醇残留≤0.05%(参照GB/T37871-2019)
DNA完整性检测:
  • 凝胶电泳法:条带完整性评分≥8(参照ISO20395:2019)
  • 微流控芯片法:片段大小偏差±5%(参照GB/T37872-2019)
RNA完整性检测:
  • RIN值测试:≥7.0(参照ISO20395:2019)
  • 毛细管电泳法:28S/18S比值≥1.5(参照GB/T37871-2019)
酶抑制物检测:
  • PCR抑制测试:CT值偏差≤1(参照ISO21571:2005)
  • qPCR法:扩增效率≥90%(参照GB/T37872-2019)
磁珠残留检测:
  • ICP-MS法:铁含量≤1ppm(参照ISO20395:2019)
  • 原子吸收法:硅残留≤0.5ppm(参照GB/T37871-2019)
核酸回收率检测:
  • qPCR回收率:≥90%(参照ISO21571:2005)
  • 标准曲线法:回收偏差±10%(参照GB/T37872-2019)

检测范围

1.全血样本:涵盖抗凝处理样本,重点检测血红蛋白残留和核酸浓度准确性。

2.血清/血浆样本:包括离心分离样本,重点检测蛋白质干扰和盐分残留。

3.组织样本(如肝脏):涵盖匀浆处理样本,重点检测蛋白酶残留和脂肪干扰。

4.细胞培养物:包括贴壁和悬浮细胞,重点检测培养基成分残留和核酸完整性。

5.唾液样本:涵盖口腔采集样本,重点检测细菌DNA污染和酶抑制物。

6.尿液样本:包括离心浓缩样本,重点检测盐分残留和代谢物干扰。

7.粪便样本:涵盖提取纯化样本,重点检测抑制剂残留和杂质浓度。

8.植物样本(如叶片):包括研磨处理样本,重点检测多糖残留和多酚干扰。

9.环境样本(如土壤):涵盖腐殖酸提取样本,重点检测腐殖酸残留和核酸回收率。

10.法医样本(如毛发):包括微量DNA提取样本,重点检测外源DNA污染和完整性评分。

检测方法

国际标准:

  • ISO20395:2019生物技术-核酸定量方法
  • ISO21571:2005食品中转基因生物核酸提取方法
  • ISO17822:2020体外诊断试剂核酸纯度检测
国家标准:
  • GB/T37871-2019生物样本中核酸提取纯化方法
  • GB/T37872-2019核酸浓度测定方法
  • GB/T37873-2019核酸残留物检测方法
方法差异说明:ISO标准采用国际通用参数如A260/A280范围1.8-2.0,而GB标准基于中国法规调整盐分残留限值至≤5mS/cm;ISO凝胶电泳法侧重条带评分,GB微流控芯片法强调片段偏差控制。

检测设备

1.紫外分光光度计:Nanodrop2000型(波长范围190-840nm,精度±0.5%)

2.荧光定量PCR仪:ABI7500型(检测通道4个,温控精度±0.1°C)

3.凝胶成像系统:GelDocXR+型(分辨率500万像素,灵敏度0.1ng)

4.离心机:Eppendorf5424R型(转速15,000rpm,容量24孔)

5.磁珠分离器:KingFisherFlex型(通量96孔,磁力强度0.5T)

6.电导率仪:MettlerToledoSevenExcellence型(测量范围0-200mS/cm,精度±0.5%)

7.GC-MS仪:Agilent7890B型(检测限0.1ppb,升温速率10°C/min)

8.ICP-MS仪:PerkinElmerNexION350D型(元素检测范围1-250amu,精度±2%)

9.酶标仪:BioTekSynergyH1型(吸光度模式波长200-999nm,荧光灵敏度1pM)

10.自动核酸提取仪:QIAcube型(处理量1-96样本,温度控制4-80°C)

11.恒温混匀器:ThermoMixerC型(转速300-3000rpm,温度范围-10-100°C)

12.水浴锅:MemmertWNB14型(温度精度±0.1°C,容量14L)

13.微流控芯片系统:Bioanalyzer2100型(片段分析范围25-12,000bp,分辨率1bp)

14.原子吸收光谱仪:PinAAcle900T型(检测限0.1ppm,波长范围185-900nm)

15.离子色谱仪:DionexICS-6000型(分离效率>50,000plates/m,流速0.1-5mL/min)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

  • 报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
  • 检测周期:7~15工作日,可加急。
  • 资质:旗下实验室拥有CMA/CNAS/ISO资质。
  • 标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
  • 非标测试:支持定制化试验方案。
  • 售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

QUALIFICATIONS

旗下实验室 · 资质荣誉

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