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GB/T39741-2022神经退行性疾病液体活检测定路线图

  • 原创官网
  • 2025-07-25 14:29:02
  • 关键字:北检研究院,GB/T39741-2022神经退行性疾病液体活检测定路线图

相关:

概述:本标准规定了神经退行性疾病液体活检测定的技术框架,核心检测对象包括脑脊液、血清、血浆等体液样本中的生物标志物。关键项目涵盖淀粉样蛋白β42、总tau蛋白、磷酸化tau181、神经丝轻链等浓度测定,以及α-突触核蛋白寡聚体检测和microRNA表达谱分析。检测流程涉及免疫分析、质谱技术和分子生物学方法,确保标准化诊断路径的生物标志物定量与定性评估。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

淀粉样蛋白检测:

  • Aβ42测定:浓度范围(0.5-200pg/mL)、Aβ40/Aβ42比值(参照ISO15197)
  • Aβ寡聚体检测:特异性结合率(≥95%)、聚集状态分析(GB/T18992.1)
Tau蛋白检测:
  • 总tau蛋白:浓度(1-1000pg/mL)、稳定性指标(变异系数≤5%)
  • 磷酸化tau181:敏感性阈值(≥0.1pg/mL)、磷酸化位点验证(参照ISO5725)
神经丝蛋白检测:
  • 神经丝轻链(NfL):浓度(0.5-500pg/mL)、分子量确认(≥68kDa)
  • 神经丝重链(NFH):磷酸化程度评估(≥3磷酸基团/分子)
α-突触核蛋白检测:
  • 总α-突触核蛋白:浓度(1-200pg/mL)、寡聚体比例(≤20%)
  • 磷酸化α-突触核蛋白:位点特异性(Ser129)、检测限(≥0.05pg/mL)
炎症标志物检测:
  • IL-6测定:浓度(0.1-100pg/mL)、动力学范围(线性R²≥0.99)
  • TNF-α检测:特异性交叉反应率(≤1%)、回收率(90-110%)
氧化应激标志物检测:
  • 8-OHdG测定:浓度(0.5-50ng/mL)、氧化损伤指数(参照GB/T27417)
  • MDA检测:灵敏度(≥0.1nM)、稳定性测试(-80°C存储)
核酸检测:
  • microRNA表达谱:Ct值阈值(≤35)、差异表达倍数(≥2倍)
  • cfDNA定量:片段大小(150-200bp)、浓度范围(1-100ng/mL)
蛋白质组学分析:
  • 蛋白质定量:动态范围(10^5倍)、鉴定数量(≥1000蛋白/样本)
  • 翻译后修饰检测:磷酸化位点验证(质谱精度≤10ppm)
代谢组学分析:
  • 代谢物谱:检测限(≤0.1μM)、通路富集分析(p值≤0.05)
  • 脂质组检测:亚类分离分辨率(R值≥1.5)
细胞外囊泡检测:
  • 外泌体浓度:粒径分布(30-150nm)、表面标志物CD63阳性率(≥80%)
  • 囊泡内容物分析:RNA载量(≥10ng/μL)、蛋白质丰度(参照ISO10993-17)

检测范围

1.脑脊液(CSF):样本量要求≥5mL,重点检测神经特异性标志物如Aβ42、磷酸化tau181及神经丝轻链浓度。

2.血清样本:需离心分离(2000g,10分钟),核心检测包括炎症因子(IL-6、TNF-α)和神经丝轻链定量。

3.血浆样本:抗凝剂处理(EDTA或肝素),重点评估凝血生物标志物及细胞外囊泡衍生microRNA。

4.尿液样本:晨尿采集,检测重点为α-突触核蛋白寡聚体及代谢物谱(如8-OHdG)。

5.唾液样本:非刺激采集,核心检测氧化应激标志物(MDA)及唾液外泌体内容物分析。

6.脑脊液沉淀物:离心后沉淀(10000g,30分钟),重点分析细胞碎片相关DNA和蛋白质聚集状态。

7.血浆外泌体:超速离心分离(100000g,2小时),检测侧重外泌体表面抗原(CD9、CD81)及RNA载量。

8.组织液样本:活检来源,核心评估局部炎症标志物和神经元损伤产物浓度。

9.血液细胞成分:白细胞分离(Ficoll梯度),重点检测细胞内核酸(如microRNA)及代谢物变化。

10.其他体液(如胸腹水):样本预处理过滤,检测重点关注神经退行相关蛋白渗漏及浓度校正。

检测方法

国际标准:

  • ISO15197:2013体外诊断医疗器械-生物样本中分析物定量检测要求
  • ISO10993-17:2022医疗器械生物评价-降解产物定量分析方法
  • ISO5725-2:2019测量方法与结果的准确度评估指南
  • CLSIEP17-A2临床实验室检测限与定量限评价协议
国家标准:
  • GB/T18992.1-2022生物样本中蛋白质测定通用规则
  • GB/T27417-2017体外诊断试剂稳定性评价导则
  • GB/T33475-2023高通量测序数据质量控制标准
  • GB/T35094-2018临床质谱分析技术规范
差异说明:国际标准如ISO15197侧重分析物定量通用要求,而国家标准GB/T18992.1更细化蛋白质检测参数;CLSIEP17-A2强调检测限评估,与GB/T27417稳定性测试存在方法互补;高通量测序中,GB/T33475要求数据质量控制高于ISO标准基线。

检测设备

1.酶标仪:SpectraMaxM5型(检测波长范围200-1000nm,精度±0.01OD)

2.三重四极杆质谱仪:Agilent6495C型(质量范围2-2000m/z,分辨率≥20000)

3.实时荧光定量PCR仪:Bio-RadCFX96型(温度精度±0.1°C,通道数6)

4.流式细胞仪:BDFACSymphonyA5型(检测速度≥50000事件/秒,激光线488nm)

5.电化学发光分析仪:RocheCobase801型(灵敏度0.1pg/mL,检测通量400测试/小时)

6.纳米粒子追踪分析仪:MalvernNanoSightNS300型(粒径范围10-2000nm,浓度检测限10^6颗粒/mL)

7.蛋白质芯片扫描仪:PerkinElmerScanArrayHT型(分辨率5μm,动态范围10^4)

8.高通量测序仪:IlluminaNovaSeq6000型(通量≥20Tb/运行,读长2×150bp)

9.超速离心机:BeckmanCoulterOptimaXE型(最大转速100000rpm,温度控制±1°C)

10.液相色谱系统:WatersACQUITYUPLCH-Class型(压力范围0-15000psi,流速精度±1%)

11.恒温混匀仪:EppendorfThermoMixerC型(温度范围-10-100°C,振荡速度300-1400rpm)

12.低温存储设备:ThermoScientificRevcoJianCeT冰箱(温度范围-86°C,容量700L)

13.生物安全柜:EscoAirstreamAC2-4S1型(洁净度Class100,风速0.3-0.5m/s)

14.微孔板洗板机:BioTekELx405型(洗液体积精度±1%,孔间交叉污染≤0.1%)

15.紫外分光光度计:ShimadzuUV-1900i型(波长范围190-1100nm,带宽0.1-5nm)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"GB/T39741-2022神经退行性疾病液体活检测定路线图"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。