ISO14644-1标准沉降菌检测

检测项目

沉降菌采样：

• 平板布点数量：根据洁净区面积确定（参照ISO14644-1AnnexB）
• 暴露时间控制：≥4小时（动态监测周期覆盖完整操作）
• 沉降平板规格：直径90±1mm（培养皿高度15mm）

培养基质量控制：

• 琼脂类型：胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）
• 培养基厚度：3.5-4.0mm（偏差≤±0.5mm）
• 无菌验证：阴性对照培养（0CFU/皿）

培养条件监控：

• 培养温度：30-35°C（波动范围±1.0°C）
• 培养时间：48-72小时（时间误差±1h）
• 湿度控制：相对湿度≥85%（防培养基脱水）

菌落计数：

• 计数规则：≥100CFU时按"TooNumerousToCount"记录
• 边缘菌落处理：两皿平均法（接触Hygiena规则）
• 数据修约：结果保留整数位（参照ISO14644-1:2015第B.4.3条）

环境参数记录：

• 温度监控：20-25°C（连续记录采样时段）
• 相对湿度：30-60%（数据记录间隔≤15分钟）
• 压差梯度：≥10Pa（相邻洁净区同步监测）

采样平面定义：

• 工作高度：0.8-1.2m（距地面）
• 关键区域：距设备/操作面≤30cm
• 规避位置：空调直吹区（风速＞0.45m/s）

动态干扰评估：

• 人员活动强度：单位面积人数（人/㎡）
• 设备运行状态：振动源距离（＞1.5m）
• 门开启频次：每小时次数记录

洁净等级判定：

• ISOClass5：≤1CFU/皿·4h
• ISOClass7：≤3CFU/皿·4h（GB50457标准等同采用）
• ISOClass8：≤10CFU/皿·4h

数据统计分析：

• 置信区间：95%UCL计算（按ISO14644-1附录C）
• 趋势分析：移动极差控制图（MR-chart）
• 超标处理：OOS调查程序触发阈值

采样规程验证：

• 暴露中断处理：＞15分钟作废
• 平板标识追溯：唯一性编码系统
• 运输温度记录：4-8°C冷链时效≤2h

检测范围

1.无菌药品生产：冻干粉针剂灌装线、无菌制剂配液系统，重点监控A级层流罩下方沉降菌

2.植入医疗器械：心脏支架涂层区、人工关节抛光车间，关注金属碎屑对沉降效率影响

3.生物安全实验室：BSL-3病原体操作台、PCR产物分析区，需验证消毒周期后沉降基线

4.微电子洁净室：光刻区、晶圆切割区，监测AMC（气载分子污染物）对菌落生长的抑制

5.食品无菌包装：灌装封口关键控制点，检测包装材料静电吸附导致的沉降异常

6.医院移植手术室：器官移植仓、造血干细胞移植舱，评估人员动线对沉降路径干扰

7.疫苗分装设施：灭活病毒灌装区、佐剂混合室，重点监测芽孢杆菌沉降风险

8.动物实验设施：SPF级小鼠饲养间、隔离器操作区，控制毛发皮屑干扰计数

9.化妆品洁净车间：眼霜灌装区、面膜精华液配制间，监控高湿度环境霉菌沉降

10.医用材料灭菌区：EO解析室、辐射灭菌包装区，验证灭菌后环境恢复周期

检测方法

国际标准：

• ISO14644-1:2015Cleanroomsandassociatedcontrolledenvironments-Part1:Classificationofaircleanlinessbyparticleconcentration
• ISO14698-1:2003Cleanroomsandassociatedcontrolledenvironments-Biocontaminationcontrol-Part1:Generalprinciplesandmethods

国家标准：

• GB/T25915.1-2021洁净室及相关受控环境第1部分：按粒子浓度划分空气洁净度等级
• GB50457-2019医药工业洁净厂房设计标准（附录C沉降菌检测方法）

方法差异说明：ISO标准要求TSA琼脂厚度≥15mm，GB50457规定为≥13mm；ISO对培养箱湿度无强制要求，GB/T25915要求≥85%RH；ISO允许20-25°C采样环境，医药洁净室强制控制18-26°C

检测设备

1.沉降培养皿：硼硅酸盐玻璃皿（Φ90×15mm，灭菌级）

2.恒温恒湿培养箱：BINDERKBW系列（温控±0.5°C，湿度±3%RH）

3.菌落计数器：SCHUETZC-CUBE400型（LED环形光，4K分辨率）

4.环境监测系统：VaisalaviewLinc温湿度记录仪（精度±0.1°C，±0.8%RH）

5.风速测量仪：TSI9565-P（量程0-30m/s，分辨率0.01m/s）

6.压差计：DWYER477A-1（范围0-250Pa，精度±0.5%FS）

7.紫外灭菌车：AtlantiumHydro-Optic55W（波长254nm，杀菌率≥99.9%）

8.生物安全运输箱：TTPLabtechcomPACT系列（4-8°C保温≥8h）

9.琼脂自动灌装机：BIOSANMediaJetPro（灌装精度±0.2ml）

10.粒子计数器：LighthouseSolair5100（0.3-5.0μm六通道）

11.培养基适用性验证仪：MerckMilliflexQuantum阳性对照系统

12.洁净工作台：EscoAirstreamClassII（ISO5级，下降风速0.32±0.01m/s）

13.时间记录器：DURAGD-LOG30（GPS校时，误差≤1秒/月）

14.生物指示剂培养器：MesaLabsCB100（温度均匀性±0.25°C）

15.菌种保藏冰箱：ThermoScientificTSX系列（-80°C±1°C）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"ISO14644-1标准沉降菌检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。