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心脏灌流钾通道活性测试

  • 原创官网
  • 2025-07-26 12:20:32
  • 关键字:北检研究院,心脏灌流钾通道活性测试

相关:

概述:心脏灌流钾通道活性测试聚焦于评估心脏组织在灌流条件下的钾离子通道功能活性,核心检测对象包括心肌细胞的电生理特性、分子表达及药理学响应。关键项目涵盖钾电流幅度、激活/失活动力学参数、通道蛋白密度等指标,采用标准化灌流系统确保环境稳定性,检测重点为通道功能异常与疾病模型的关联性分析,支持心血管药物筛选和病理机制研究。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

电生理特性:

  • 钾离子电流幅度测量:稳态电流密度(pA/pF)、峰值电流(nA)(参照ISO19001)
  • 激活/失活动力学:激活时间常数(τ-act,ms)、失活时间常数(τ-inact,ms)(如:τ-act≤5ms)
  • 膜电位依赖性:半最大激活电压(V1/2,mV)、斜率因子(k)
分子表达分析:
  • 通道蛋白定量:蛋白浓度(μg/mg总蛋白)、相对表达量(foldchange)
  • mRNA水平检测:拷贝数(copies/μgRNA)、表达差异(±0.5log2fold)
药理学响应:
  • 抑制剂效应:IC50值(nM)、最大抑制率(%)
  • 激动剂效应:EC50值(nM)、激活效率(foldincrease)
  • 选择性测试:通道亚型特异性(Ki值差异≤10%)
功能性测试:
  • 动作电位参数:持续时间(APD90,ms)、幅度(mV)
  • 心律失常风险评估:早后除极发生率(events/min)
形态学评估:
  • 细胞结构完整性:膜完整性指数(%)、损伤评分(0-5级)
  • 亚细胞定位:通道蛋白分布密度(particles/μm²)
生化指标:
  • 离子浓度测定:细胞内钾浓度(mM)、梯度变化率(%/min)
  • 氧化应激标记:ROS水平(荧光强度单位)
基因表达:
  • RT-qPCR验证:基因表达量(ΔΔCt值)、调控因子检测
  • 表观遗传分析:甲基化水平(%)
蛋白质组学:
  • 通道互作蛋白:结合亲和力(Kd,nM)、互作网络规模
  • 磷酸化状态:磷酸化位点占有率(%)
细胞活力:
  • 存活率测试:活细胞比例(%)、凋亡指数
  • 代谢活性:ATP含量(nmol/mg蛋白)
信号传导:
  • 第二信使响应:cAMP浓度(pmol/mg)、钙瞬变幅度(ΔF/F0)
  • 通路激活:磷酸化蛋白水平(foldchange)

检测范围

1.大鼠心室肌组织:涵盖正常及病理模型,重点检测缺血再灌注损伤下的钾通道电流衰减与恢复动态。

2.小鼠心房肌样本:针对遗传修饰模型,侧重通道亚型特异性表达差异及动作电位参数变化。

3.人心肌活检组织:来自心脏手术样本,检测重点为心律失常相关通道突变的功能验证与药理学响应。

4.豚鼠心脏灌流模型:适用于长QT综合征研究,评估延迟整流钾电流的变化率和稳定性。

5.转基因动物心脏:如通道过表达或敲除模型,聚焦分子表达与电生理表型的相关性分析。

6.缺血再灌注模型:模拟心肌梗死条件,检测通道活性恢复时间、氧化应激影响及保护剂效应。

7.药物处理样本:暴露于抗心律失常药物,测试IC50/EC50值、选择性及潜在毒性响应。

8.培养心肌细胞系:如HL-1细胞,侧重标准化灌流下的通道动力学重复性测试。

9.心脏切片制备:薄层切片用于高分辨率成像,评估局部通道分布与电传导同步性。

10.心力衰竭模型:慢性疾病样本,检测通道下调机制、表达量变化与功能补偿效应。

检测方法

国际标准:

  • ISO15197:2013离子通道电生理记录方法(使用全细胞膜片钳技术,电压协议范围-100mV至+50mV)
  • ISO10993-5:2021生物材料功能性测试(评估通道活性在灌流系统中的稳定性)
  • ISO17025:2017分析验证流程(要求重复性误差≤5%,涵盖电流幅度校准)
国家标准:
  • GB/T16886.6-2022医疗器械生物学评价(电生理测试部分采用固定灌流速率,而ISO允许可变流速)
  • GB/T27407-2011细胞电生理技术规范(电压钳模式参数设定差异:GB要求步阶幅度10mV,ISO为5mV)
  • GB/T5009.1-2023生物样本处理方法(样本预处理温度控制在4°C,而ISO标准为室温)

检测设备

1.膜片钳放大器:Axon700B型(带宽0-10kHz,噪声水平≤0.1pA)

2.灌流系统:WarnerRC-27型(流速范围0.1-10mL/min,温度控制±0.5°C)

3.倒置显微镜:OlympusIX83型(分辨率0.2μm,荧光成像通道4个)

4.实时PCR仪:Bio-RadCFX96型(检测动态范围106,升温速率5°C/s)

5.微电极拉制仪:SutterP-1000型(电阻范围1-10MΩ,尖端直径≤1μm)

6.电生理数据采集系统:MolecularDevicesDigidata1550B型(采样率200kHz,AD转换16位)

7.离心机:Eppendorf5424R型(转速范围100-15000rpm,温度控制-10°C至40°C)

8.荧光分光光度计:HitachiF-7000型(激发波长200-750nm,检测限0.01nM)

9.细胞培养箱:ThermoScientificHeracell150i型(CO2控制±0.1%,湿度维持90%)

10.切片机:LeicaVT1200S型(切片厚度10-100μm,振动频率80Hz)

11.离子浓度分析仪:JenwayPFP7型(钾离子检测范围0.1-100mM,精度±0.05mM)

12.活细胞成像系统:NikonTi2-E型(时间分辨率10ms,共聚焦扫描深度100μm)

13.电化学工作站:CHI660E型(电流范围±250mA,电位扫描速率1V/s)

14.冷冻离心机:BeckmanCoulterAllegraX-30R型(最大离心力30000xg,温度-20°C)

15.微注射系统:EppendorfFemtoJet4i型(注射压力100-5000hPa,精度±1pL)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"心脏灌流钾通道活性测试"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

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