检测项目
酶活性检测:
- 超氧化物歧化酶(SOD):活性单位(U/mL,参照ISO22160:2020)
- 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px):活性单位(nmol/min/mL)
- 过氧化氢酶(CAT):活性单位(U/mL)
- 总抗氧化能力(TAC):mmol/L(参照ASTME2529-13)
- 还原型谷胱甘肽(GSH):μmol/L
- 维生素C:mg/L
- 丙二醛(MDA):nmol/mL(参照GB/T5009.XX)
- 8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG):pg/mL
- 蛋白质羰基化:nmol/mgprotein
- 脂质过氧化物(LOOH):μmol/L
- 硫代巴比妥酸反应物(TBARS):nmol/mL
- 8-氧代脱氧鸟苷(8-oxo-dG):ng/mL
- 彗星试验尾矩:%DNAintail
- 维生素E:μg/mL
- β-胡萝卜素:μg/L
- SOD1mRNA:foldchange(参照实时PCR标准)
- GPX1mRNA:foldchange
- 氧化应激指数:ratio(MDA/GSH)
- 抗氧化状态评分:基于多参数整合
- 细胞内活性氧(ROS):荧光强度
- 线粒体膜电位(ΔΨm):相对单位
- 外泌体SOD活性:U/mL
- 外泌体MDA含量:nmol/mL
检测范围
1.脑脊液新鲜样本:重点检测即时抗氧化酶活性和氧化损伤标志物,用于急性神经炎症评估与疾病急性期诊断。
2.脑脊液冻存样本:适用于长期病理研究,检测重点为样本稳定性、抗氧化物质保留率及冻融影响分析。
3.血清样本:评估全身性氧化应激状态,与脑脊液数据对比,用于血脑屏障功能完整性研究。
4.脑组织匀浆:用于实验动物或尸检样本,检测局部脑区(如海马体)抗氧化能力分布及区域特异性氧化损伤。
5.脑脊液-血清对:比较中枢神经系统与外周血液的氧化差异,重点分析氧化应激梯度及临床相关性。
6.脑脊液细胞沉淀:离心后细胞层样本,检测细胞内抗氧化酶活性及细胞源性氧化应激标志物。
7.脑脊液衍生外泌体:分离外泌体,评估其携带的抗氧化因子(如外泌体SOD)及氧化损伤标志物,用于神经通讯机制研究。
8.脑脊液实时监测样本:动态采集样本,检测抗氧化能力时间变化,用于疾病进展监测与治疗响应评估。
9.脑脊液与脑脊液引流液:比较不同来源脑脊液,重点检测引流过程中抗氧化成分变化及临床干预效果。
10.脑脊液模拟样本:人工配制质量控制样本,用于方法验证、仪器校准及检测精度控制。
检测方法
国际标准:
- ISO22160:2020总抗氧化能力测定方法
- ASTME2529-13脂质过氧化检测标准方法
- ISO10993-18:2020生物材料抗氧化性能评价
- ENISO19001:2018酶活性测定通用要求
- ISO148-1:2022氧化损伤标志物分析规范
- GB/T5009.XX食品中抗氧化能力测定方法
- GB/T16886.10-2017医疗器械生物学评价第10部分:刺激与迟发型超敏反应试验
- GB/T27417-2017临床实验室检测方法确认指南
- GB/T20144-2006生物样品中维生素测定方法
- GB/T5750-2023生活饮用水标准检验方法
检测设备
1.紫外-可见分光光度计:ThermoScientificNanoDrop2000(波长范围190-840nm,精度±0.001A)
2.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(检测限0.1ng/mL,流速范围0.001-10mL/min)
3.荧光光谱仪:PerkinElmerLS55(激发波长200-800nm,发射波长200-900nm)
4.多功能酶标仪:BioTekSynergyH1(检测模式:吸光、荧光、发光)
5.实时定量PCR仪:AppliedBiosystems7500Fast(温度精度±0.1℃,荧光通道4个)
6.高速冷冻离心机:Eppendorf5430R(最大转速15000rpm,温度范围-10℃至40℃)
7.冷冻干燥机:LabconcoFreeZone2.5(冷凝温度-50℃,真空度<100mTorr)
8.数字均质器:IKAT25digital(转速3000-25000rpm,处理体积0.5-100mL)
9.精密pH计:MettlerToledoSevenCompact(测量范围0-14pH,精度±0.01)
10.生物安全柜:ESCOAirstreamClassII(气流速度0.45m/s,HEPA过滤效率99.99%)
11.超低温冰箱:HaierDW-86L388(温度范围-40℃至-86℃)
12.微量移液器组:EppendorfResearchplus(体积范围0.1-1000μL,精度±0.5%)
13.恒温水浴锅:MemmertWB22(温度范围室温至100℃,精度±0.1℃)
14.振荡培养箱:IKAHS501digital(速度50-1500rpm,温度范围室温至60℃)
15.倒置荧光显微镜:OlympusBX53(放大倍数40-1000×,荧光滤光片组)