HHV-7DNA定量测试

检测项目

DNA提取：

• 提取效率：回收率≥95%（参照ISO21571）
• 纯度检测：A260/A280比值1.8-2.0，A260/A230比值≥2.0

• 浓度测定：检测范围0.1-1000ng/μL（精度±5%）
• 完整性评估：片段长度≥500bp（电泳法参照GB/T37869）

• 扩增效率：斜率值-3.0至-3.5（R²≥0.99）
• 循环阈值：Ct值检测限10拷贝/μL（参照ISO17822）

• 交叉反应性：无HHV-6/HHV-8干扰（验证方法GB/T19495.2）
• 引物特异性：熔解曲线单峰（Tm值±0.5°C）

• 检测下限：LOD≤5拷贝/反应（参照ISO22174）
• 线性范围：10-10⁶拷贝/μL（R²≥0.98）

• 内标基因：β-actinCt值20-25（偏差±1.0）
• 重复性验证：CV≤5%（n=3）

• 储存条件：-80°C保存期≥6个月（降解率≤10%）
• 冻融耐受：≤3次循环（Ct值变化±0.5）

• 阴性对照：无扩增信号（参照GB/T37869）
• 环境监控：气溶胶检测阴性

• 定量算法：ΔΔCt法（误差±0.2）
• 报告阈值：病毒载量≥50拷贝/mL（临床判定）

• 格式规范：符合ISO15189要求
• 数据完整性：元数据记录率100%

检测范围

1.全血样本：EDTA抗凝处理，重点检测免疫抑制患者病毒载量动态变化

2.血清样本：离心分离血清，侧重高脂血干扰下的DNA回收率优化

3.血浆样本：肝素抗凝，核心检测凝血因子对qPCR抑制效应

4.唾液样本：非侵入性采集，关注口腔微生物DNA交叉污染控制

5.尿液样本：离心浓缩处理，重点评估低浓度DNA扩增效率

6.组织活检样本：福尔马林固定石蜡包埋，侧重DNA片段化修复技术

7.细胞培养上清：病毒培养液，核心检测细胞残留DNA背景干扰

8.干血斑样本：滤纸干燥保存，重点验证长期储存DNA稳定性

9.脑脊液样本：无菌采集，侧重低体积样本浓缩方法

10.拭子样本：咽喉或鼻腔拭子，核心检测采样棉纤维抑制物去除

检测方法

国际标准：

• ISO17822:2019分子体外诊断试验—病毒DNA定量检测性能要求
• ISO22174:2005食物链微生物学—聚合酶链反应检测病原体方法
• ISO15189:2022医学实验室—质量和能力要求

• GB/T19495.2-2004转基因产品检测核酸定量PCR方法
• GB/T37869-2019核酸检测用试剂盒质量评价技术规范
• GB/T35823-2018临床分子诊断试剂盒技术要求

检测设备

1.核酸提取仪：MagCoreHF16型（通量96样本/次，磁珠回收率≥98%）

2.实时荧光定量PCR仪：7500型（检测通道5个，温度精度±0.1°C）

3.分光光度计：NanoDropOne型（波长范围190-840nm，检测限0.2ng/μL）

4.高速离心机：AllegraX-15R型（最大转速15000rpm，容量6×50mL）

5.恒温混匀器：ThermoMixerC型（温度范围4-99°C，振荡频率300-1500rpm）

6.生物安全柜：ClassIIA2型（气流速度0.5m/s，HEPA过滤效率99.99%）

7.超低温冰箱：-80°C型（温度稳定性±3°C，容量700L）

8.微量移液器：单道移液器（量程0.1-1000μL，精度±1%）

9.PCR板封膜机：自动封膜仪（密封压力10-15psi，兼容96孔板）

10.电泳系统：凝胶成像仪（分辨率5M像素，紫外透射波长302nm）

11.恒温培养箱：37°C型（温度均匀性±0.5°C，容量150L）

12.水浴锅：数字控制型（温度范围20-100°C，精度±0.1°C）

13.数据分析软件：qPCR分析软件（兼容ΔΔCt算法，数据导出格式CSV）

14.样本存储系统：自动化样本库（条形码识别率100%，存储温度-20°C至-80°C）

15.气溶胶检测仪：实时监控仪（灵敏度0.3μm颗粒，报警阈值≥5颗粒/L）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"HHV-7DNA定量测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。