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流式细胞术破壁率定量试验

  • 原创官网
  • 2025-07-28 10:18:38
  • 关键字:北检研究院,流式细胞术破壁率定量试验

相关:

概述:流式细胞术破壁率定量试验是一种基于激光散射和荧光检测的生物分析方法,专注于精确测定细胞壁破碎的程度。核心检测对象为机械或化学处理的各类细胞样本,关键项目包括破壁细胞比例(≥95%)、完整细胞残留率(≤5%)、细胞粒径分布(变异系数≤15%)以及荧光强度变化(激发波长488nm)。该方法适用于微生物学、生物工程和制药领域,实现高通量、高精度定量评估,确保破壁过程标准化。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

细胞完整性检测:

  • 破壁率:破壁细胞比例(参照ISO13321)、完整细胞残留率(≤5%)
  • 细胞活性:存活率(≥90%)、凋亡细胞比例(≤10%)
粒径分布分析:
  • 粒径中值:平均粒径(1-10μm)、粒径变异系数(CV≤15%)
  • 分布宽度:D10/D90比值(0.5-2.0)
荧光标记检测:
  • 荧光强度:平均荧光强度(激发488nm,发射530nm)、荧光背景值(≤5%)
  • 标记效率:标记细胞比例(≥98%)
样本处理参数:
  • 破碎强度:破碎时间(10-30min)、压力参数(0.5-2.0MPa)
  • 均匀性:样本分散度(≤10%)
质量控制指标:
  • 重复性:相对标准偏差(RSD≤5%)、回收率(95%-105%)
  • 检出限:破壁细胞检出限(0.1%)
细胞类型验证:
  • 类型占比:目标细胞类型比例(≥99%)、杂质细胞率(≤1%)
  • 形态学:细胞圆度(0.9-1.0)
光学特性检测:
  • 散射光:前向散射强度(FSC)、侧向散射强度(SSC)
  • 光吸收:吸收系数(450nm处)
数据精度参数:
  • 分辨率:粒径分辨率(0.1μm)、荧光分辨率(8-bit)
  • 准确性:标准偏差(SD≤0.5)
破碎效率评估:
  • 效率指数:破壁效率(≥98%)、碎片生成率(≤2%)
  • 残留物:细胞壁残留量(≤0.5%)
标准物质校准:
  • 校准偏差:校准曲线线性(R²≥0.99)、偏移量(±3%)
  • 参考值比对:标准物质匹配度(95%-105%)

检测范围

1.酵母细胞:涵盖酿酒酵母和毕赤酵母,重点检测机械破壁后的细胞完整性及粒径均匀性。

2.革兰氏阳性细菌:包括枯草芽孢杆菌等,侧重化学破壁效率及完整细胞残留率。

3.革兰氏阴性细菌:如大肠杆菌,重点评估酶解破壁效果及荧光标记准确性。

4.植物细胞:烟草细胞和拟南芥细胞,检测破壁强度对细胞活性影响。

5.藻类细胞:小球藻和螺旋藻,侧重破碎后粒径分布及光合色素荧光变化。

6.真菌细胞:黑曲霉和酵母菌,重点检测高温破壁过程及细胞碎片生成率。

7.哺乳动物细胞:HeLa细胞和CHO细胞,评估温和破壁参数及细胞凋亡比例。

8.微生物发酵样本:发酵液浓缩物,检测杂质干扰及破壁率重现性。

9.生物制药中间体:重组蛋白表达细胞,侧重破碎均匀性及产物残留。

10.环境微生物样本:土壤和水体提取物,重点检测混合细胞类型占比及破壁效率。

检测方法

国际标准:

  • ISO13321:1996粒度分析-激光衍射法(强调粒径分布测量)
  • ASTME2520-21流式细胞术标准指南(规定荧光标记和散射光分析)
  • ISO10993-5:2009生物相容性试验-细胞毒性检测(涵盖细胞活性评估)
国家标准:
  • GB/T19077-2016粒度分布激光衍射法(结合荧光检测,与国际标准差异在于分辨率要求更高)
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价-细胞毒性试验(侧重细胞存活率测定,与ISO差异在样本处理步骤)
  • GB/T35578-2017细胞计数方法通则(包括破壁率计算,差异在于数据处理算法)

检测设备

1.流式细胞仪:BDFACSAriaIII(流速范围0.1-100μL/min,分辨率0.1μm)

2.激光粒度分析仪:MalvernMastersizer3000(粒径范围0.01-3500μm,精度±0.1%)

3.荧光显微镜:OlympusBX53(物镜放大倍数40X-100X,激发波长488nm)

4.高速离心机:Eppendorf5810R(最大转速15000rpm,容量6x100mL)

5.高压均质机:GEAPandaPlus2000(压力范围50-2000bar,流量10L/h)

6.超声波破碎仪:SonicsVCX750(频率20kHz,功率750W)

7.酶解反应釜:LabconcoProtector(温度范围4-80°C,搅拌速度50-500rpm)

8.激光共聚焦显微镜:LeicaTCSSP8(Z轴分辨率0.35μm,扫描速度40fps)

9.分光光度计:ShimadzuUV-2600(波长范围190-1400nm,带宽0.1nm)

10.样本制备系统:HamiltonMicrolabSTAR(移液精度0.1μL,通量96孔板)

11.恒温振荡器:ThermoScientificMaxQ6000(温度范围室温-100°C,振幅20mm)

12.细胞计数器:BeckmanCoulterVi-CellXR(检测速度60样本/h,尺寸范围2-70μm)

13.荧光分光仪:PerkinElmerLS55(检测限0.01ppb,扫描速度240nm/min)

14.冷冻干燥机:MillrockLD85(冷阱温度-85°C,真空度0.01mbar)

15.数据处理工作站:DellPrecision7865(处理器IntelXeon,内存128GB)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"流式细胞术破壁率定量试验"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。