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心脏灌流心肌细胞坏死性凋亡测试

  • 原创官网
  • 2025-07-28 10:28:12
  • 关键字:北检研究院,心脏灌流心肌细胞坏死性凋亡测试

相关:

概述:心脏灌流心肌细胞坏死性凋亡测试采用离体灌流模型(如Langendorff系统),核心检测心肌细胞在缺血再灌流损伤下的死亡机制。聚焦坏死性凋亡双路径指标:检测对象包括细胞活性(存活率≥85%)、凋亡标志物(Caspase-3活化率、DNA碎片化指数)和坏死标记物(LDH释放量、膜完整性)。关键项目整合形态学、生化和分子分析,确保高精度量化细胞死亡动力学,适用于心血管药物评估及病理机制研究。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

细胞活性检测:

  • 细胞存活率:存活细胞比例(≥85%,参照ISO10993-5)、膜完整性(PI染色阳性率≤5%)
  • 代谢活性:MTT还原率(OD值增量≥0.8)、ATP含量(≥5μmol/mg蛋白)
凋亡标记检测:
  • Caspase活化:Caspase-3活性(单位/mg蛋白,参照AnnexinV标准)、Caspase-9活性(荧光强度增幅)
  • DNA损伤:TUNEL阳性率(≤10%)、DNAladdering(凝胶电泳条带量化)
坏死标记检测:
  • 细胞膜通透性:LDH释放率(≤15%对照)、钙黄绿素渗漏(荧光衰减指数)
  • 坏死特异性:HMGB1释放量(ELISA值μg/mL)、细胞肿胀率(直径增幅≤10%)
氧化应激检测:
  • 活性氧水平:DCF荧光强度(相对单位≤1.2)、SOD活性(U/mg蛋白≥30)
  • 脂质过氧化:MDA含量(nmol/mg蛋白≤2)、GSH/GSSG比值(≥5)
线粒体功能检测:
  • 膜电位变化:JC-1红绿比(≥1.5)、ΔΨm衰减率(≤20%)
  • 呼吸链活性:复合物I活性(nmol/min/mg蛋白)、ROS生成速率(荧光斜率)
钙离子动态检测:
  • 胞内钙浓度:Fluo-4荧光强度(相对变化±0.5)、钙震荡频率(次/分钟)
  • 钙储存:SERCA活性(ATPase单位)、RyR开放概率(电生理参数)
基因表达分析:
  • 凋亡相关基因:Bax/Bcl-2比值(RT-qPCRCt值)、p53表达量(foldchange≤1.2)
  • 坏死相关基因:RIPK1表达(mRNA水平)、MLKL磷酸化(Westernblot密度)
蛋白质表达检测:
  • 凋亡蛋白:Cytochromec释放(μg/mg蛋白)、PARP裂解(条带积分)
  • 坏死蛋白:TNF-α含量(pg/mL)、NLRP3炎性体活化(免疫荧光强度)
形态学评估:
  • 超微结构:线粒体肿胀率(电镜图像量化)、核固缩指数(≤50%)
  • 细胞形态:凋亡小体计数(个/视野)、坏死区域面积(μm²)
功能学测试:
  • 收缩功能:收缩幅度(%基线)、舒张时间(ms)
  • 电生理参数:动作电位时程(APD90ms)、传导速度(cm/s)

检测范围

1.大鼠离体心脏灌流模型:涵盖SD或Wistar大鼠心脏,重点检测缺血30分钟再灌流诱导的坏死性凋亡平衡及药物干预效果

2.小鼠心肌细胞原代培养:使用C57BL/6小鼠心肌细胞,侧重缺氧复氧模型的凋亡标志物动态变化及基因沉默影响

3.人心肌干细胞分化模型:基于iPSC衍生心肌细胞,检测分化成熟度相关的凋亡敏感性及坏死阈值

4.猪心脏灌流系统:适用于大型动物模型,重点评估灌流压力变化对线粒体功能及钙离子紊乱的坏死响应

5.兔心室肌切片:利用离体切片技术,检测区域特异性凋亡扩散及坏死核心形成机制

6.转基因动物心肌组织:如凋亡基因敲除模型,侧重突变对坏死性凋亡交叉路径的定量分析

7.3D心肌细胞培养物:类器官或支架培养,重点检测三维结构下的细胞死亡空间分布及力学响应

8.冷冻保存心肌样本:复苏后组织,检测低温损伤相关的凋亡加剧及坏死修复能力

9.药理处理心肌模型:如阿霉素诱导损伤,侧重化疗药物剂量依赖的坏死性凋亡转换点

10.老龄心肌组织:老年动物来源,检测老化相关的氧化应激累积及凋亡抵抗机制

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5医疗器械生物学评价体外细胞毒性试验(细胞存活率检测差异:采用中性红染色替代MTT)
  • ISO19004分子生物学检测通则(DNA碎片化分析差异:要求荧光定量而非凝胶电泳)
  • ASTMF2315细胞培养标准指南(凋亡标记检测差异:强调流式细胞术而非显微镜)
国家标准:
  • GB/T16886.5医疗器械生物学评价体外细胞毒性试验(参数差异:LDH释放率阈值高于ISO)
  • GB/T27402实验室质量管理规范(钙离子检测差异:规定Fluo-4浓度标准)
  • GB/T20145细胞凋亡检测方法通则(形态学评估差异:要求高分辨率成像系统)

检测设备

1.离体心脏灌流系统:ADILangendorff1200型(灌流压范围40-120mmHg,精度±0.5%)

2.倒置荧光显微镜:OlympusIX83型(分辨率0.1μm,荧光通道6个)

3.流式细胞仪:BDFACSCelesta型(检测速度10000细胞/秒,激光波长488nm)

4.微电极阵列系统:MCSMEA2100型(采样频率10kHz,电极数64)

5.酶标仪:ThermoMultiskanSkyHigh型(波长范围200-1000nm,精度±0.01OD)

6.实时PCR仪:Bio-RadCFX96型(温控精度±0.1°C,通道数4)

7.高内涵成像系统:PerkinElmerOperettaCLS型(视野数1000,Z轴分辨率0.5μm)

8.电生理记录仪:AxonMultiClamp700B型(电流钳范围±2nA,带宽10kHz)

9.超速离心机:BeckmanOptimaXPN-100型(转速100000rpm,温度控制±1°C)

10.荧光分光光度计:HitachiF-7000型(激发波长200-900nm,灵敏度0.001FU)

11.电镜系统:JEOLJEM-1400型(放大倍数1000000x,分辨率0.2nm)

12.紫外分光光度计:ShimadzuUV-2600型(波长精度±0.1nm,扫描速度2000nm/min)

13.细胞培养箱:ThermoHeracell150i型(CO2控制±0.1%,湿度范围95%)

14.微透析系统:CMA402型(流速0.1-10μL/min,回收率≥80%)

15.振动切片机:LeicaVT1200S型(切片厚度5-100μm,振动频率60Hz)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"心脏灌流心肌细胞坏死性凋亡测试"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。