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EJianCeDNA定量试验

  • 原创官网
  • 2025-07-30 17:29:55
  • 关键字:北检研究院,EJianCeDNA定量试验

相关:

概述:EJianCeDNA定量试验是一种分子生物学检测方法,专注于定量测定Epstein-Barr病毒(EJianCe)DNA在生物样本中的拷贝数。核心检测对象为EJianCe特异性核酸序列,使用实时荧光定量PCR技术实现高灵敏度(检测限低至10拷贝/mL)和高特异性(针对BALF5基因靶点)。关键项目包括样本核酸提取效率(≥95%)、扩增曲线分析(Ct值范围18-35)、线性动态范围(10^2-10^9拷贝/mL)、质量控制参数(阴性对照Ct>40),适用于血清、血浆等多种样本类型,支持疾病诊断和疗效监测。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

样本采集与处理:

  • 样本稳定性:储存温度(-80℃±2℃)、时效性(≤48小时处理)
  • 抗凝剂选择:EDTA浓度(1.5-2.0mg/mL,参照CLSIH21-A3)
核酸提取:
  • 提取效率:DNA回收率(≥95%)
  • 纯度测定:A260/A280比值(1.8-2.0)
  • 浓度校准:参考标准品(NISTSRM2372)
PCR扩增:
  • 扩增曲线:Ct值范围(18-35循环)
  • 特异性验证:非靶序列交叉反应(检出率≤0.1%)
定量分析:
  • 拷贝数计算:标准曲线拟合(R²≥0.99)
  • 动态范围:线性区间(10^2-10^9拷贝/mL)
质量控制:
  • 阴性对照:Ct值(>40)
  • 阳性对照:靶基因检出(Ct值20-25)
  • 内参基因:管家基因表达(GAPDHCt值15-30)
校准验证:
  • 批次间偏差:CV值(≤5%)
  • 仪器校准:频率(每季度一次)
敏感性测试:
  • 检测限:最低检出浓度(10拷贝/mL)
  • 稀释线性:梯度稀释验证(偏差±0.5log)
特异性测试:
  • 交叉反应:其他病毒干扰(CMV、HHV-6检出率≤0.05%)
  • 引物特异性:BLAST比对一致性(>99%)
重复性验证:
  • 批内精密度:重复测试CV(≤2%)
  • 批间精密度:日间差异(CV≤3%)
数据报告:
  • 结果输出:拷贝数/mL(单位标准化)
  • 不确定度:测量误差范围(±0.3log)

检测范围

1.血清样本:用于常规EJianCe感染筛查,重点检测病毒载量动态变化以评估急性感染阶段

2.血浆样本:适用于高通量检测,侧重抗凝剂干扰排除和低浓度样本(<50拷贝/mL)精确测定

3.全血样本:涵盖白细胞DNA检测,重点评估DNA稳定性和提取效率在长期储存条件

4.组织活检样本:如淋巴组织或肿瘤样本,检测重点为石蜡包埋组织DNA降解控制(片段大小≥100bp)

5.脑脊液样本:用于神经系统EJianCe相关疾病,侧重低体积样本(≥200μL)浓缩处理和污染防控

6.唾液样本:非侵入性监测,重点检测酶抑制剂影响和样本均质化处理

7.尿液样本:针对特定肾病患者,侧重pH值调整(6.5-7.5)和杂质去除效率

8.骨髓样本:用于淋巴瘤诊断,重点检测稀有细胞DNA富集和抑制剂清除

9.细胞培养上清:研究用样本,侧重病毒复制动态监测和培养基成分干扰排除

10.环境拭子样本:如表面擦拭样本,检测重点为空气污染物清除和背景DNA控制

检测方法

国际标准:

  • ISO15189:2022医学实验室质量和能力要求
  • CLSIMM19-A2分子诊断定量检测指南
  • WHOEJianCePCR标准化方案
国家标准:
  • GB/T37870-2019病毒核酸定量检测通用要求
  • YY/T1596-2017医用PCR分析仪性能评价方法
  • GB19489-2008实验室生物安全通用要求
方法差异说明:ISO标准强调全程质控和不确定度评估,而GB标准侧重操作规范和安全防护;WHO方案指定BALF5靶基因引物,CLSI则提供详细交叉验证流程

检测设备

1.实时荧光PCR仪:QuantStudio12KFlex(温度精度±0.1℃,通道数6)

2.自动化核酸提取仪:KingFisherFlex(通量96样本/小时,磁珠回收率99%)

3.高速离心机:AllegraX-30R(转速30000rpm,温控范围4-40℃)

4.微量分光光度计:NanoDropOne(检测范围2-15000ng/μL,分辨率0.1ng/μL)

5.恒温混匀器:ThermoMixerC(振荡频率300-1500rpm,温控精度±0.5℃)

6.生物安全柜:ClassIIA2型(气流流速0.5m/s,HEPA过滤效率99.99%)

7.超低温冰箱:-80℃型号(温度稳定性±1℃,容积800L)

8.微量移液器:ResearchPlus系列(量程0.1-1000μL,精度±0.5%)

9.凝胶电泳系统:Mini-PROTEANTetra(电压范围50-500V,胶床尺寸8x10cm)

10.倒置显微镜:CKX53(放大倍数40-400x,LED光源)

11.恒温水浴锅:WB-6(温度范围20-100℃,稳定性±0.1℃)

12.电子天平:ME204E(量程0.1mg-220g,精度0.0001g)

13.pH计:FiveEasyFE28(测量范围0-14,精度±0.01)

14.超纯水系统:Milli-QIQ7000(电阻率18.2MΩ·cm,总有机碳<5ppb)

15.数据采集系统:LabChartPro(采样率1kHz,兼容多设备接口)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"EJianCeDNA定量试验"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。