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多发性硬化症寡克隆区带电泳试验

  • 原创官网
  • 2025-07-30 18:39:29
  • 关键字:北检研究院,多发性硬化症寡克隆区带电泳试验

相关:

概述:多发性硬化症寡克隆区带电泳试验是一种用于神经免疫性疾病诊断的生化检测技术,核心检测对象为脑脊液样本中的IgG寡克隆带。关键项目包括凝胶电泳分离效率(分辨率≥5条带/mm)、免疫固定特异性(抗IgG抗体浓度0.1-1.0μg/mL)和条带定量分析(密度梯度法参照CSF分析指南),旨在识别异常免疫球蛋白谱以确诊多发性硬化症。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

样本预处理:

  • 离心步骤:转速3000-5000rpm(时间10-15分钟),蛋白浓度检测(范围0.5-5.0g/L)
  • 缓冲液配制:pH值7.2-7.6(偏差±0.1),离子强度0.15M
凝胶电泳分离:
  • 凝胶制备:聚丙烯酰胺浓度8-12%(厚度1.0-1.5mm),加载量10-20μL/孔
  • 电泳条件:电压120-200V(时间45-60分钟),温度控制4-8℃
免疫固定分析:
  • 抗体结合:抗IgG抗体效价1:50-1:100(孵育时间30-45分钟)
  • 条带显影:染色灵敏度OD值≥0.8(参照IFCC标准)
条带定量:
  • 密度测定:灰度值范围0-255(精度±1%),条带数量计数(≥2条为阳性)
  • 比率计算:CSF/血清IgG指数≥0.7(参照MS诊断指南)
质量控制:
  • 内标物质:β-球蛋白带位置偏差≤2mm
  • 重复性测试:CV值≤5%(三次平行试验)
干扰物排除:
  • 溶血检测:游离血红蛋白浓度≤0.02g/dL
  • 脂血评估:浊度值≤10NTU
结果判读:
  • 阳性标准:条带宽度≥1mm,离散度≤0.5mm
  • 阴性对照:背景噪声抑制率≥90%
报告参数:
  • 条带模式分类:单克隆/寡克隆/多克隆(参照IWGMS分类)
  • 定量输出:IgG合成率(mg/24h)计算
仪器校准:
  • 电泳槽校准:电流稳定性±1mA
  • 成像系统校准:像素分辨率≥2400dpi
安全验证:
  • 生物污染控制:无菌测试通过率100%(参照生物安全规范)
  • 废弃物处理:灭活温度≥121℃(时间15分钟)

检测范围

1.脑脊液样本:涵盖腰椎穿刺获取的CSF,检测重点为IgG寡克隆带异常模式以确诊多发性硬化症。

2.血清对照样本:用于配对分析,检测重点为IgG指数计算以排除系统性炎症干扰。

3.神经免疫疾病筛查样本:包括视神经脊髓炎谱系病例,检测重点为条带特异性与MS鉴别诊断。

4.临床研究样本:涉及队列研究中的冷冻CSF,检测重点为长期稳定性验证与批次一致性。

5.质量控制样本:商业质控品或自制标准品,检测重点为重复性精度与系统误差评估。

6.儿科脑脊液样本:适用于儿童患者,检测重点为低体积样本适应性(≥0.5mL)与稀释因子校正。

7.治疗后监测样本:免疫调节剂用药后CSF,检测重点为条带动态变化与疗效评估。

8.感染性疾病排除样本:如神经梅毒或莱姆病CSF,检测重点为交叉反应性最小化与特异性验证。

9.存储样本:长期冻存CSF(-80℃),检测重点为样本降解指标(如蛋白变性率≤5%)。

10.法医鉴定样本:涉及神经病理学案例,检测重点为证据链完整性与可追溯性。

检测方法

国际标准:

  • ISO15189:2022医学实验室质量与能力要求(电泳方法章节)
  • CLSIEP05-A3精密性能评价方案(重复性测试部分)
  • IFCCGuidelinesforCSFAnalysis(条带判读标准)
国家标准:
  • GB/T20468-2023临床实验室检验技术要求(免疫电泳部分)
  • YY/T1789-2024体外诊断试剂性能评价通则(灵敏度验证)
  • WS/T661-2024脑脊液检验技术规范(样本处理流程)
方法差异说明:ISO标准强调全流程质控,而GB标准侧重国产试剂兼容性;IFCC指南要求条带计数≥2为阳性,但YY标准允许引入辅助抗体验证。

检测设备

1.电泳系统:SEBIAHYDRASYS2(分辨率5条带/mm,电压范围0-300V)

2.成像分析仪:GEImageQuant800(灵敏度0.01OD,扫描速度10秒/板)

3.离心机:Eppendorf5804R(最大转速5000rpm,温度控制±0.5℃)

4.分光光度计:ShimadzuUV-2600i(波长范围190-1100nm,精度±0.001AU)

5.免疫固定装置:HelenaSAS-1(抗体孵育槽容量50孔,温控±1℃)

6.凝胶制备器:Bio-RadProteanXi(凝胶厚度精度±0.1mm,灌胶速度5mL/min)

7.微量加样器:GilsonPipetmanL(量程0.5-1000μL,误差≤0.5%)

8.温控水浴槽:JulaboF12(温度范围-10-100℃,稳定性±0.1℃)

9.条带密度计:Bio-RadGS-900(灰度分析深度8位,软件兼容性DICOM)

10.生物安全柜:EscoAirstreamAC2-4E1(气流流速0.45m/s,HEPA过滤效率99.99%)

11.冷冻存储设备:ThermoScientificJianCeT-1386(温度-86℃,波动±1℃)

12.pH计:MettlerToledoSevenExcellence(精度±0.01pH,自动校准功能)

13.浊度计:Hach2100Q(量程0-1000NTU,分辨率0.01NTU)

14.数据管理系统:LIMSLabWareV8(数据存储容量1TB,审计追踪功能)

15.电泳电源:ConsortEV243(输出电流0-500mA,电压稳定性99.9%)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"多发性硬化症寡克隆区带电泳试验"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。