代谢组学非靶向筛选抗逆标志物研究测定

检测项目

样品前处理检测：

• 提取效率检测：回收率（≥85%）、残留溶剂浓度（≤0.1ppm，参照ISO17025）
• 衍生化验证：反应产率（≥95%）、副产物比例（≤2%）
• 稳定性测试：室温降解率（≤5%/h，参照GB/T27404）

色谱分离检测：

• 保留时间精度：相对标准偏差（RSD≤0.5%）
• 峰对称性因子：拖尾因子（0.8-1.2）
• 分辨率检测：色谱柱性能（R≥1.5）

质谱检测：

• 灵敏度测试：检出限（LOD≤0.1ng/mL）、定量限（LOQ≤0.5ng/mL）
• 质量精度偏差：质量误差（≤2ppm）
• 碎片离子比：相对丰度差（≤15%）

数据预处理检测：

• 峰对齐精度：保留时间漂移（≤0.1min）
• 基线校正误差：信号噪声比（S/N≥10）
• 归一化一致性：内标响应变异（RSD≤8%）

代谢物鉴定检测：

• 数据库匹配度：相似度评分（≥90%，参照HMDB）
• 同位素分布检验：理论与实际偏差（≤5%）
• 二级谱验证：碎片离子覆盖率（≥80%）

定量分析检测：

• 浓度线性范围：相关系数（R²≥0.99）
• 精密度测定：日内RSD（≤6%）、日间RSD（≤10%）
• 准确度验证：加标回收率（90%-110%）

统计分析检测：

• 差异性筛选：p值（≤0.05）、倍数变化（FC≥2）
• 多变量分析：主成分载荷值（≥0.7）
• 聚类一致性：欧氏距离（≤0.3）

标志物筛选检测：

• ROC曲线分析：AUC值（≥0.85）
• 特异性验证：混淆矩阵准确率（≥90%）
• 稳健性测试：交叉验证误差（≤10%）

通路富集检测：

• KEGG映射率：通路覆盖率（≥70%）
• 富集显著性：FDR校正p值（≤0.05）
• 代谢流验证：通量变化率（RSD≤12%）

生物验证检测：

• 体外活性测试：IC50值（精确度±5%）
• 体内响应关联：相关系数（|r|≥0.8）
• 交叉样本验证：验证集准确率（≥85%）

检测范围

1.植物组织样本：涵盖叶片、根系及种子提取物，重点检测干旱胁迫下代谢物动态变化及抗氧化标志物筛选

2.动物血清样本：包括哺乳类及禽类血清，侧重热应激诱导的脂质代谢紊乱标志物定量分析

3.微生物培养液：细菌、真菌发酵液样本，着重盐度胁迫相关氨基酸和有机酸标志物鉴定

4.人体尿液样本：健康与疾病个体尿液，核心检测氧化应激标志物如8-OHdG浓度变异

5.血液样本：全血及血浆样本，重点分析重金属暴露下代谢通路异常标志物

6.环境水体样本：湖泊、河流提取物，侧重污染物抗性相关的微生物代谢物筛查

7.食品基质样本：谷物、果蔬加工品，着重保鲜剂抗性标志物的非靶向筛选

8.药物处理细胞样本：肿瘤细胞及干细胞培养物，核心检测化疗耐药性相关代谢物谱

9.转基因生物样本：工程化植物或微生物，重点验证基因修饰下抗逆代谢网络变化

10.临床组织样本：活检组织及肿瘤切片，侧重疾病抗性标志物的空间代谢组学分析

检测方法

国际标准：

• ISO21367:2020代谢组学样品前处理规范
• ISO/IEC17025:2017质谱数据质量保证要求
• FDABioanalyticalMethodValidation2022代谢物定量验证指南
• EMEA/CHMP/ICH/2011生物标志物统计分析框架

国家标准：

• GB/T27417-2017代谢组学数据处理技术要求
• GB/T33426-2016液相色谱-质谱联用分析方法
• GB/T38165-2019非靶向代谢物筛选规程
• GB5009.268-2021食品中代谢物检测通用方法

（方法差异说明：ISO标准强调全流程质控链，而GB/T27417-2017更注重数据归一化算法；FDA指南要求LOD/LOQ验证采用加标法，GB/T33426-2016则允许标准曲线法；EMEA框架使用FDR校正，GB/T38165-2019优先采用Bonferroni校正）

检测设备

1.超高效液相色谱仪：WatersACQUITYUPLCH-Class（流速范围0.01-5mL/min，柱温控制±0.1℃）

2.四极杆飞行时间质谱仪：SciexX500BQTOF（质量范围20-40000Da，分辨率≥40000）

3.气相色谱-质谱联用仪：Agilent8890/5977B（温度梯度范围-50℃至450℃，扫描速度50Hz）

4.核磁共振光谱仪：BrukerAVANCEIIIHD（场强14.1T，采样频率1GHz）

5.自动液体处理器：HamiltonMicrolabSTAR（移液精度±0.5μL，通量96孔板/min）

6.高速离心机：EppendorfCentrifuge5920R（最大转速21000rpm，温控范围-20℃至40℃）

7.真空冷冻干燥机：ChristAlpha1-4LDplus（冷阱温度-85℃，真空度≤0.1mbar）

8.质谱数据分析软件：MetaboAnalyst5.0（算法库包含XCMS和MS-DIAL，处理速度≥1000谱/min）

9.恒温振荡培养箱：MemmertINB400（温度均匀性±0.5℃，湿度范围20%~90%）

10.超低温冰箱：ThermoScientificTSX系列（温度稳定性-80℃±2℃，容量1000L）

11.纳米粒度分析仪：MalvernZetasizerNanoZS（粒径范围0.3nm-10μm，精度±2%）

12.多功能酶标仪：BioTekSynergyH1（检测波长200-1000nm，动态范围0-4OD）

13.离子淌度质谱仪：WatersVionIMSQTOF（碰撞截面分辨率≥100，漂移时间精度±0.1ms）

14.自动固相萃取系统：GilsonGX-274（回收率稳定性RSD≤3%，支持96孔板）

15.高分辨显微镜：ZeissAxioObserver7（放大倍数40x-1000x，成像分辨率≤200nm）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

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