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心脏灌流心肌细胞端粒长度分析

  • 原创官网
  • 2025-07-31 14:21:33
  • 关键字:北检研究院,心脏灌流心肌细胞端粒长度分析

相关:

概述:心脏灌流心肌细胞端粒长度分析专注于在模拟心脏血流条件下评估心肌细胞端粒的动态变化。核心检测对象为心肌细胞核端粒,关键项目包括端粒长度定量、端粒酶活性测定及关联分子标志物检测。技术采用高精度荧光原位杂交(FISH)和定量PCR(qPCR)方法,聚焦端粒缩短与细胞衰老机制,适用于心脏疾病模型研究中数据重现性和标准化控制。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

端粒生物学检测:

  • 端粒长度测定:平均长度(kb)、相对端粒长度比值(RTL)(参照国际指南)
  • 端粒酶活性分析:端粒酶逆转录酶活性(单位:IU)
细胞活力评估:
  • 细胞存活率检测:存活细胞比例≥90%
  • 凋亡指标测定:caspase-3活性(单位:μmol/min/mg)
分子标志物检测:
  • 衰老相关基因表达:p16INK4amRNA水平(相对表达量)
  • 氧化应激标志物:活性氧(ROS)浓度(单位:μM)
基因表达分析:
  • 端粒保护复合物基因:TRF1表达水平(相对定量)
  • 端粒酶催化亚基:hTERTmRNA检测(表达量阈值≥2倍)
蛋白质水平检测:
  • 端粒结合蛋白定量:POT1蛋白浓度(单位:ng/μg)
  • 衰老相关蛋白:β-半乳糖苷酶活性(比色法结果)
氧化应激评估:
  • 抗氧化酶活性:超氧化物歧化酶(SOD)活性(单位:U/mg)
  • 脂质过氧化产物:丙二醛(MDA)含量(单位:nmol/mg)
凋亡参数测定:
  • 凋亡细胞比例:AnnexinV阳性率(%)
  • 凋亡诱导因子:Bax/Bcl-2比值(相对比值)
炎症因子检测:
  • 细胞因子水平:TNF-α浓度(单位:pg/mL)
  • 炎症介质:IL-6表达量(相对定量)
代谢功能分析:
  • ATP生成能力:ATP浓度(单位:μmol/mg)
  • 线粒体呼吸功能:氧消耗率(OCR)(单位:pmol/min)
结构完整性评估:
  • 心肌细胞形态学:胞核完整性评分(1-5级)
  • 细胞膜完整性:乳酸脱氢酶(LDH)泄漏率(%)

检测范围

1.人类心肌活检样本:涵盖心力衰竭患者心肌组织,侧重端粒长度缩短与疾病进展相关性检测

2.大鼠心脏灌流模型:模拟缺血再灌注损伤,重点评估端粒动力学变化及细胞保护机制

3.小鼠心肌细胞原代培养:幼鼠与老龄鼠对比样本,检测端粒酶活性与衰老标志物表达

4.猪心脏离体灌流系统:大动物模型样本,聚焦端粒长度变异与灌流参数关联性

5.人心肌细胞系:AC16细胞系样本,用于高通量端粒长度及基因突变筛查

6.转基因动物心肌组织:端粒酶缺陷模型样本,重点分析端粒维持机制异常

7.心肌缺血模型样本:缺氧诱导组织,检测端粒缩短速率与氧化应激响应

8.药物处理心肌细胞:抗衰老化合物暴露样本,评估端粒长度保护效果及相关通路

9.心力衰竭患者血清样本:循环游离DNA来源,侧重端粒长度作为生物标志物的可行性

10.胚胎心肌发育样本:胎儿心肌组织,分析端粒动态与细胞增殖关系

检测方法

国际标准:

  • ISO17025:2017端粒长度定量荧光原位杂交方法(采用端粒特异性探针)
  • ISO15189:2022心肌细胞端粒酶活性检测规程(基于TRAP分析法)
  • ISO10993-5:2009细胞活力评估标准(MTT比色法原理)
国家标准:
  • GB/T16886.5-2017端粒相关基因表达定量PCR方法(SYBRGreen检测)
  • GB/T27401-2008心肌细胞氧化应激标志物测定规范(DCFH-DA荧光法)
  • GB/T19077-2016细胞凋亡流式细胞术分析标准(AnnexinV/PI双染)
(方法差异说明:国际标准ISO17025强调探针校准步骤,而国家标准GB/T16886.5侧重于引物优化差异;ISO15189使用放射性标记,GB/T27401采用无标记荧光技术灵敏度更高)

检测设备

1.荧光显微镜系统:ModelFM-3000(分辨率0.1μm,激发波长488nm)

2.实时定量PCR仪:ModelPCR-5000(检测限0.01ng/μL,温度精度±0.1°C)

3.流式细胞分析仪:ModelFC-2000(流速10μL/s,检测通道6个)

4.酶标仪系统:ModelEM-400(波长范围300-700nm,精度±2%)

5.激光共聚焦显微镜:ModelLCM-150(Z轴分辨率0.5μm,扫描速度1frame/s)

6.细胞培养箱:ModelCC-100(温度控制37±0.5°C,CO2浓度5%)

7.高速离心机:ModelHC-800(转速25000rpm,容量50mL)

8.蛋白印迹系统:ModelWB-250(转移效率>90%,检测灵敏度0.1ng)

9.氧消耗测定仪:ModelOCR-120(分辨率1pmol/min,采样频率1Hz)

10.核酸提取工作站:ModelNE-600(提取纯度A260/A280≥1.8,通量96样本)

11.低温存储设备:ModelLS-80(温度范围-80°C,稳定性±1°C)

12.显微成像分析软件:ModelIA-700(图像分析精度±2%,支持3D重构)

13.电化学发光检测器:ModelEC-400(检测范围1-1000pg/mL,信噪比>100:1)

14.气相色谱质谱联用仪:ModelGCMS-550(分离效率>95%,检测限0.1ppb)

15.多功能酶动力学仪:ModelKE-300(动力学范围0.01-100μM,温度控制25-45°C)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"心脏灌流心肌细胞端粒长度分析"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。