检测项目
1.核酸提取与纯化:样本中细菌基因组脱氧核糖核酸提取、提取效率评估、抑制剂去除检测。
2.引物与探针特异性验证:针对保护性抗原基因、荚膜合成基因等靶点的引物探针设计验证、交叉反应性测试。
3.聚合酶链式反应扩增:常规聚合酶链式反应、实时荧光定量聚合酶链式反应、多重聚合酶链式反应。
4.扩增产物分析:凝胶电泳成像分析、熔解曲线分析、扩增曲线实时监测与阈值判定。
5.检测灵敏度与检出限确定:系列稀释阳性模板检测、最低检出拷贝数测定。
6.检测特异性评估:近缘芽孢杆菌及其他常见病原体交叉反应测试。
7.重复性与再现性验证:批内重复检测、批间重复检测、不同操作人员间再现性测试。
8.内标系统监控:内源性内标检测、外源性内标添加与回收率监控。
9.不同样本类型前处理:土壤样本前处理、水体样本富集、拭子样本洗脱、组织样本匀浆处理。
10.阳性结果确认:扩增产物测序验证、序列比对分析。
11.实验室污染监控:阴性对照设置、环境空白对照检测、气溶胶污染排查。
12.检测方法验证:与国家标准培养分离方法进行对比验证、符合率计算。
检测范围
可疑污染土壤、地表水与地下水体、空气中悬浮颗粒物、可疑白色粉末或其他不明物质、患者皮肤拭子、血液标本、痰液标本、感染动物组织与脏器、动物皮毛与骨粉、工业用动物毛发原料、肉制品与乳制品、饲料及其原料、实验室培养物、生物安全柜与实验室环境拭子、防护装备表面拭子、运输载体表面拭子、医疗废弃物、土壤改良剂、污水处理厂污泥
检测设备
1.实时荧光定量聚合酶链式反应仪:用于靶标基因的扩增与荧光信号实时监测;具备多通道荧光检测能力,可同时进行多重检测与内标监控。
2.核酸自动提取仪:用于自动化完成样本裂解、核酸结合、洗涤与洗脱;提高提取效率与一致性,减少人工操作误差。
3.电泳系统:包括电泳仪与凝胶成像分析系统;用于常规聚合酶链式反应产物的分离与条带大小确认。
4.生物安全柜:提供样本前处理与核酸提取操作的生物安全防护屏障;防止病原体泄露与操作人员暴露。
5.高速冷冻离心机:用于样本的快速沉降、细胞收集及反应液的短暂离心;确保样本与试剂充分集中于管底。
6.超微量分光光度计:用于微量核酸提取产物浓度与纯度的快速测定;评估脱氧核糖核酸的质量是否符合扩增要求。
7.涡旋混合器:用于液体样本与试剂的快速充分混匀;确保反应体系的均一性。
8.金属浴或干式恒温器:提供样本裂解、酶消化等步骤所需的精确温度控制环境。
9.超纯水系统:制备无核酶、无污染的分子生物学实验用水;作为试剂配制与稀释的关键基础。
10.微量移液器:用于纳升级至毫升级液体的精确移取;是构建准确反应体系的核心工具,需定期进行校准。