检测项目
1.金属硫蛋白定量分析:采用ICP-MS测定Cd/Zn结合量(检测限0.01μg/g,线性范围0.05-50μg/g)
2.重金属结合能力测定:通过竞争性螯合实验评估Cu⁺/Hg⁺结合常数(Kd值精度5%)
3.巯基(-SH)含量测定:Ellman法测定总巯基浓度(波长412nm,RSD≤2.5%)
4.分子量分布分析:SEC-HPLC测定亚型比例(MT-1/MT-2分离度≥1.5)
5.热稳定性测试:差示扫描量热法测定变性温度(升温速率1℃/min)
检测范围
1.生物样本:兔肝组织匀浆液(冻存时间≤6个月)
2.医药制剂:含金属硫蛋白的肝病治疗药物(注射级纯度≥98%)
3.食品添加剂:富硒酵母提取物(MT含量≥0.15mg/g)
4.环境监测:工业污染区动物肝脏样本(Hg/Cd/Pb全项筛查)
5.科研标准品:重组兔源MT-1a冻干粉(NISTSRM3280比对)
检测方法
ASTME2941-14《电感耦合等离子体质谱法测定生物样品中金属硫蛋白》
ISO21483:2017《分子排阻色谱法测定蛋白质分子量分布》
GB/T35809-2018《生物样品中巯基化合物测定分光光度法》
GB5009.268-2016《食品中多元素测定》(扩展应用于肝组织)
AOAC999.10《重金属形态分析技术规范》
检测设备
ThermoFisheriCAPRQICP-MS(质量数范围3-265amu,检出限0.1ppt)
Agilent1260InfinityIIHPLC(配备BioSEC-3色谱柱,300孔径)
ShimadzuUV-2600i分光光度计(波长范围190-1400nm,带宽1nm)
MalvernZetasizerNanoZSP(动态光散射测粒径,精度0.3nm)
BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机(最大转速100,000rpm)
PerkinElmerPyris1DSC(温度范围-170℃~725℃,灵敏度0.2μW)
MilestoneETHOSUP微波消解仪(40位转子,压力200bar)
Bio-RadMini-PROTEANTetra电泳系统(电压范围10-300V)
SartoriusCubisIIMSA225S分析天平(分辨率0.01mg,符合GLP)
EppendorfMastercyclerX50PCR仪(温控精度0.1℃)