检测项目

1.抑制活性测定：采用放射性标记法或荧光法测定ATP结合位点抑制率（浓度范围0.1-100μM）

2.IC50值测定：通过剂量-响应曲线计算半数抑制浓度（误差范围5%）

3.激酶选择性分析：比对同源家族10种以上激酶的交叉反应性

4.时间依赖性抑制试验：监测0-120分钟内抑制效率变化（采样间隔15分钟）

5.可逆性验证：采用透析法评估抑制剂解离常数（KD值精度达nM级）

检测范围

1.小分子药物候选化合物：包括酪氨酸激酶抑制剂、CDK抑制剂等临床前研究物质

2.天然产物提取物：植物多酚类、微生物次级代谢产物等生物活性物质

3.抗体类药物：针对EGFR、VEGFR等靶点的治疗性单克隆抗体

4.细胞裂解液样本：肿瘤细胞系中激酶活性调控分析

5.纳米载药系统：脂质体/聚合物包裹的缓释型抑制剂制剂

检测方法

1.ISO21427:2018《体外激酶活性测定通用技术要求》

2.ASTME2946-13《高通量激酶抑制剂筛选标准指南》

3.GB/T40182-2021《生物活性评价用蛋白激酶抑制试验通则》

4.GB4789.41-2020《食品安全国家标准蛋白激酶抑制剂残留量测定》

5.JISK3850-3:2020《空气中致敏物质测定第3部分：蛋白激酶活性抑制法》

检测设备

1.PerkinElmerEnVision2105：多功能酶标仪（荧光偏振/TR-FRET双模式）

2.BeckmanCoulterBiomeki7：自动化液体处理工作站（移液精度0.5%）

3.Agilent6495CQ-TOF：三重四极杆质谱仪（质量精度<1ppm）

4.GEHealthcareAKTApure25：快速蛋白液相色谱系统（流速范围0.001-25mL/min）

5.ThermoScientificVarioskanLUX：全波长扫描式读数仪（波长范围200-1000nm）

6.EppendorfMastercyclerX50：梯度PCR仪（温控精度0.1℃）

7.MalvernPanalyticalZetasizerUltra：动态光散射仪（粒径测量范围0.3nm-10μm）

8.SartoriusCubisIIMSA：百万分之一天平（称量范围2.1g/82g双量程）

9.HamiltonSTARletR4：机械臂辅助样品前处理系统（96孔板并行处理）

10.WatersACQUITYUPLCH-Class：超高效液相色谱系统（耐压15000psi）