检测项目

1.总高胱氨酸浓度测定：定量范围0.5-50μmol/L，RSD≤3.5%

2.游离型与结合型比例分析：结合态蛋白水解度≥98%

3.氧化代谢产物检测：包括胱硫醚（Cystathionine）和同型半胱氨酸硫氧化物（Hcy-SO）

4.同型半胱氨酸硫内酯（Hcy-thiolactone）含量测定：检出限0.1nmol/gHb

5.热稳定性测试：70℃水浴30分钟条件下的降解率测定

检测范围

1.生物样本：人血清/血浆（EDTA抗凝）、脑脊液、组织匀浆液

2.食品基质：婴幼儿配方奶粉（蛋白质含量≥10%）、发酵乳制品

3.药用原料：L-高胱氨酸硫内酯原料药（纯度≥99.5%）

4.动物饲料：含硫氨基酸预混料（蛋氨酸含量0.5-3.0%）

5.环境样品：制药废水中的含硫化合物残留（浓度范围0.01-10mg/L）

检测方法

ASTMD8023-17《高效液相色谱法测定生物液体中总同型半胱氨酸》

ISO15193:2009《体外诊断医疗器械-生物源性样品中量的测量-参考测量程序的表述》

GB/T5009.124-2016《食品中氨基酸的测定》液相色谱法

GB/T35876-2018《乳制品中硫氨基酸的测定液相色谱-串联质谱法》

JY/T0580-2020《分析型高效液相色谱方法通则》

检测设备

ThermoScientificVanquishUHPLC系统：配备荧光检测器（激发波长385nm/发射波长515nm）

Agilent6495B三重四极杆质谱仪：MRM模式下定量限达0.01ng/mL

WatersACQUITYUPLCHSST3色谱柱（1.8μm,2.1100mm）：耐受pH1.7-8.0流动相

EppendorfCentrifuge5430R：最大转速30,000g的低温离心系统

CEMDiscover微波消解仪：实现95℃2℃的温和蛋白水解条件

PerkinElmerLambda365紫外可见分光光度计：用于衍生化反应终点判定

SartoriusCubisMSA225S-1CE-DM分析天平：最小称量值0.01mg的微量称量

HamiltonStarlet液体工作站：实现1%移液精度的自动化前处理

MettlerToledoSevenExcellencepH计：分辨率0.001pH的缓冲液配制系统

LabconcoCentriVap真空浓缩仪：40℃条件下溶剂蒸发速率≥1mL/min