检测项目
1.核苷酸纯度分析:采用HPLC法测定主成分含量≥98.0%,杂质峰面积≤2.0%
2.碱基组成测定:UPLC-MS/MS定量分析腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)摩尔比
3.游离核苷酸含量:离子色谱法检测ATP/ADP/AMP浓度范围0.01-100μmol/L
4.修饰核苷酸鉴定:MALDI-TOF质谱识别5-甲基胞嘧啶等8种常见修饰类型
5.热稳定性测试:差示扫描量热仪测定Tm值精度0.5℃
检测范围
1.食品类:婴幼儿配方奶粉(添加核苷酸总量≤0.12g/100g)
2.药品类:抗病毒药物(阿德福韦酯原料药纯度≥99.5%)
3.生物制品:DNA合成试剂盒(引物长度20-100bp)
4.环境样本:水体中微生物DNA浓度(检出限0.1ng/mL)
5.工业原料:mRNA疫苗原液(完整度≥90%,dsRNA残留≤0.1%)
检测方法
ISO21570:2005食品中转基因成分核酸提取与定量
GB/T34796-2017核酸浓度测定分光光度法
ASTME2148-16焦磷酸测序法验证DNA序列
ISO20395:2018二代测序文库质量评价规范
GB4789.40-2020食品微生物分子生物学检验通则
检测设备
1.ThermoScientificVanquishHPLC系统:配备DAD检测器(190-800nm),色谱柱AccucoreC18(2.6μm)
2.Agilent2100Bioanalyzer:DNA/RNA完整性指数(RIN)测定分辨率达1bp
3.WatersXevoTQ-Smicro液质联用仪:MRM模式定量限0.01pg/μL
4.NanoDropOne超微量分光光度计:样品体积1μL,A260/A280纯度比测定误差0.05
5.RocheLightCycler480IIqPCR仪:支持HRM高分辨熔解曲线分析
6.MalvernZetasizerNanoZSP:动态光散射法测量核酸粒径(0.3nm-10μm)
7.BeckmanCoulterPA800Plus:毛细管电泳分离ss/dsDNA片段(10-48,500bp)
8.EppendorfMastercyclerX50s:梯度PCR温控精度0.1℃