检测项目

1.激酶活性测定：ATP消耗速率（μmol/min）、底物磷酸化效率（pmol/mg）

2.磷酸化位点鉴定：质谱分辨率（≥30,000FWHM）、磷酸化肽段覆盖率（＞85%）

3.抑制剂IC50值测定：半数抑制浓度（nM级）、剂量响应曲线R值（≥0.98）

4.热稳定性分析：Tm值（℃）、ΔTm变化量（1.5℃）

5.蛋白表达水平：WesternBlot灰度值分析（ImageJV1.53）、ELISA定量限（1-100ng/mL）

检测范围

1.肿瘤组织样本：乳腺癌HER2/neu受体、肺癌EGFR突变体

2.重组蛋白制品：原核/真核表达系统纯化激酶（纯度≥95%）

3.小分子化合物库：激酶抑制剂候选药物（分子量＜500Da）

4.细胞培养物：转染激酶突变体的HEK293细胞系

5.血清/血浆样本：可溶性激酶片段检测（离心力3000g）

检测方法

1.ISO15197:2013体外诊断系统-酶联免疫法

2.ASTME2941-14高通量筛选技术规范

3.GB/T37864-2019生物样品中蛋白质磷酸化检测通则

4.GB/T34818-2017细胞信号通路活性评价指南

5.ISO10993-18:2020生物材料分子相互作用测试

检测设备

1.ThermoFisherMultiskanSkyHigh酶标仪（波长范围340-850nm）

2.Agilent2100Bioanalyzer蛋白质电泳系统（灵敏度0.1ng/μL）

3.PerkinElmerEnVision多模式读板机（Z因子＞0.7）

4.BrukertimsTOFPro质谱仪（扫描速度200Hz）

5.GEHealthcareBiacoreT200分子互作仪（RU值分辨率0.1）

6.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪（488/640nm双激光）

7.MolecularDevicesSpectraMaxi3x荧光检测模块（CV＜3%）

8.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪（温控精度0.1℃）

9.Bio-RadChemiDocMP成像系统（动态范围4orders）

10.MalvernPanalyticalZetasizerNanoZSP粒径分析仪（粒径范围0.3nm-10μm）