检测项目
1.16SrRNA基因测序:V3-V4区扩增测序,读长2300bp,覆盖度≥99%
2.全基因组测序:IlluminaNovaSeq平台PE150模式,测序深度≥100
3.毒力基因筛查:stx1/stx2、eaeA、hlyA等30种毒力因子PCR验证
4.抗生素耐药基因检测:blaCTX-M、tetA/B、qnrS等45种耐药基因探针杂交
5.多位点序列分型(MLST):7个管家基因(adk,fumC,gyrB,icd,mdh,purA,recA)扩增测序
检测范围
1.食品样本:生鲜肉类(牛肉/禽肉)、乳制品(巴氏杀菌乳/奶酪)、即食蔬菜
2.医疗临床样本:粪便培养物、血液分离株、尿液标本
3.环境样本:污水处理厂出水体、养殖场土壤基质
4.药品原料:胰蛋白酶制剂、肝素钠粗品
5.化妆品原料:植物提取物(芦荟胶/洋甘菊浸膏)、动物源性胶原蛋白
检测方法
ISO16654:2001食品中大肠杆菌O157:H7分离鉴定法
GB/T4789.3-2016食品微生物学检验大肠菌群计数
ASTMD5246-19水样中大肠杆菌膜过滤法
ISO13136:2012食源性致病菌实时PCR检测规程
GB/T34796-2017核酸定量测定SYBRGreenI荧光法
检测设备
1.IlluminaNovaSeq6000:高通量双通道测序系统,通量6Tb/run
2.ThermoFisherQubit4.0:荧光计定量仪,检测范围0.1-60ng/μL
3.Bio-RadCFX96Touch:实时定量PCR仪,支持六色荧光通道
4.EppendorfMastercyclerX50s:梯度PCR仪,温控精度0.1℃
5.OxfordNanoporeGridIONX5:长读长测序平台,读长>10kb
6.BeckmanCoulterBiomeki7:自动化液体处理工作站,移液精度1%
7.Agilent4200TapeStation:核酸质量分析系统,DNA片段评估范围50-5000bp
8.MiltenyiBiotecGentleMACSOcto:组织样本均质系统,8通道并行处理
9.SartoriusIncuSafeCO170:恒温培养箱,温度波动0.2℃
10.HamiltonSTARletIVD:全自动微生物接种仪,划线速度200皿/小时