检测项目
1. ROS总水平测定:DCFH-DA探针法(激发波长488nm/发射波长525nm),检测限0.1nmol/L
2. 超氧阴离子(O₂⁻)定量:HE染色结合流式细胞术(线性范围0.05-50μmol/L)
3. 过氧化氢(H₂O₂)浓度分析:Amplex Red试剂盒(灵敏度10pmol/孔)
4. 羟基自由基(·OH)捕获:电子顺磁共振(EPR)结合DMPO自旋捕集剂(g值2.006)
5. 线粒体ROS特异性检测:MitoSOX Red探针(Ex/Em=510/580nm)
检测范围
1. 哺乳动物细胞培养物(原代/传代细胞系)
2. 植物组织提取液及悬浮细胞
3. 模式生物活体样本(斑马鱼胚胎、果蝇组织)
4. 药物诱导氧化应激模型
5. 纳米材料生物相容性评估
检测方法
1. ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价-细胞毒性试验中ROS测定规范
2. ASTM E2526-08(2018) 纳米颗粒诱导ROS生成的体外测试指南
3. GB/T 27844-2011 化学品线粒体膜电位及ROS联合检测法
4. GB/T 38114-2019 细胞氧化应激标志物检测通则
5. ISO 21427-2:2006 水质-遗传毒性测定中SOS显色法结合ROS分析
检测设备
1. BD FACSCanto II流式细胞仪:多色荧光同步分析(3激光8色配置)
2. Olympus IX83倒置荧光显微镜:配备CellSens成像系统(60×油镜NA1.42)
3. Bruker EMXnano EPR谱仪:X波段微波系统(频率9.3-9.5GHz)
4. Thermo Varioskan LUX酶标仪:支持化学发光/荧光偏振双模式
5. Agilent Seahorse XFe96能量代谢分析仪:实时线粒体ROS动态监测
6. PerkinElmer EnVision多模式读板机:具备FRET功能(波长范围230-850nm)
7. Zeiss LSM 980共聚焦显微镜:Airyscan 2超分辨模块(分辨率120nm)
8. Beckman Coulter CytoFLEX流式细胞仪:配置405/488/638nm三激光器