细胞内活性氧检测

细胞内活性氧(ROS)是氧化代谢的关键副产物,其动态平衡与细胞功能及病理状态密切相关。本文系统阐述ROS检测的核心项目、适用样本类型、标准化方法及关键仪器配置,重点涵盖荧光探针法、化学发光法及电子顺磁共振技术等主流分析手段的灵敏度、特异性及操作规范。

原创阅读 172025-04-15工程师CMACNASISO高新技术企业

检测项目

1. ROS总水平测定:DCFH-DA探针法(激发波长488nm/发射波长525nm),检测限0.1nmol/L

2. 超氧阴离子(O₂⁻)定量:HE染色结合流式细胞术(线性范围0.05-50μmol/L)

3. 过氧化氢(H₂O₂)浓度分析:Amplex Red试剂盒(灵敏度10pmol/孔)

4. 羟基自由基(·OH)捕获:电子顺磁共振(EPR)结合DMPO自旋捕集剂(g值2.006)

5. 线粒体ROS特异性检测:MitoSOX Red探针(Ex/Em=510/580nm)

检测范围

1. 哺乳动物细胞培养物(原代/传代细胞系)

2. 植物组织提取液及悬浮细胞

3. 模式生物活体样本(斑马鱼胚胎、果蝇组织)

4. 药物诱导氧化应激模型

5. 纳米材料生物相容性评估

检测方法

1. ISO 10993-5:2009 医疗器械生物学评价-细胞毒性试验中ROS测定规范

2. ASTM E2526-08(2018) 纳米颗粒诱导ROS生成的体外测试指南

3. GB/T 27844-2011 化学品线粒体膜电位及ROS联合检测法

4. GB/T 38114-2019 细胞氧化应激标志物检测通则

5. ISO 21427-2:2006 水质-遗传毒性测定中SOS显色法结合ROS分析

检测设备

1. BD FACSCanto II流式细胞仪:多色荧光同步分析(3激光8色配置)

2. Olympus IX83倒置荧光显微镜:配备CellSens成像系统(60×油镜NA1.42)

3. Bruker EMXnano EPR谱仪:X波段微波系统(频率9.3-9.5GHz)

4. Thermo Varioskan LUX酶标仪:支持化学发光/荧光偏振双模式

5. Agilent Seahorse XFe96能量代谢分析仪:实时线粒体ROS动态监测

6. PerkinElmer EnVision多模式读板机:具备FRET功能(波长范围230-850nm)

7. Zeiss LSM 980共聚焦显微镜:Airyscan 2超分辨模块(分辨率120nm)

8. Beckman Coulter CytoFLEX流式细胞仪:配置405/488/638nm三激光器

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

  • 报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
  • 检测周期:7~15工作日,可加急。
  • 资质:旗下实验室拥有CMA/CNAS/ISO资质。
  • 标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
  • 非标测试:支持定制化试验方案。
  • 售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

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