检测项目
1.病毒核酸检测:实时荧光定量PCR(qPCR),灵敏度≤10copies/μL
2.病毒抗原检测:ELISA法(VP2蛋白),检测限≤5ng/mL
3.血清抗体检测:间接免疫荧光法(IFA),效价≥1:40可判阳性
4.病毒分离培养:A9细胞系培养观察CPE效应
5.电镜形态学鉴定:负染法观察直径18-24nm二十面体结构
检测范围
1.实验动物组织样本:肝/脾/肾组织匀浆液
2.细胞培养物:原代细胞/传代细胞系上清液
3.生物制品原料:胎牛血清/胰蛋白酶等原材料
4.实验器械洗脱液:笼具/饮水系统冲洗液
5.基因工程产品:重组病毒载体/单克隆抗体中间体
检测方法
ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》
GB/T34791-2017《实验动物微生物学等级及监测》
ASTMF2312-18《细胞培养产品中病毒污染测试标准指南》
GB19489-2008《实验室生物安全通用要求》
ISO/IEC17025:2017《检测和校准实验室能力通用要求》
检测设备
1.Bio-RadCFX96实时荧光定量PCR仪:TaqMan探针法核酸定量
2.ThermoMultiskanFC酶标仪:450nm波长ELISA吸光度测定
3.Eppendorf5430R高速冷冻离心机:20000g样本预处理
4.LeicaDMi8倒置荧光显微镜:40物镜观察细胞病变效应
5.MiltenyiBiotecgentleMACS组织匀浆器:程序化组织破碎
6.HitachiHT7800透射电镜:120kV加速电压观察病毒颗粒
7.SartoriusIncubatorCB170恒温培养箱:37℃0.5℃细胞培养
8.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪:FITC标记抗体分析
9.MettlerToledoXSR205电子天平:0.01mg精度称量试剂
10.ThermoHeracellVIOS160iCO₂培养箱:5%CO₂浓度控制