检测项目
1.菌落总数测定:平板计数法测定样本中酪酸梭菌浓度(110^6~110^12CFU/g)
2.活菌率分析:流式细胞仪检测活/死细胞比例(≥85%为合格)
3.纯度鉴定:16SrRNA基因测序(相似度≥99.5%)
4.产孢率测试:显微镜观察孢子形成比例(≥90%)
5.毒素基因筛查:PCR法检测α毒素基因(cpa)、肠毒素基因(cpe)等致病因子
检测范围
1.药品制剂:微生态活菌片/胶囊/散剂
2.食品添加剂:发酵乳制品、保健食品
3.动物饲料:畜禽水产用益生菌制剂
4.工业发酵产物:丁酸、乙酸等代谢产物
5.环境样本:土壤、水体中的野生型菌株
检测方法
1.GB4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》
2.ISO15214:1998《微生物学-食品和动物饲料-乳酸杆菌计数》
3.GB/T38580-2020《微生物源酶制剂抗菌活性检测》
4.ASTME2180-18《评估固体材料抗菌活性的标准试验方法》
5.ISO16140-3:2021《食物链微生物学-方法验证-第3部分:特定应用的验证协议》
检测设备
1.BACT/ALERT3D全自动微生物培养系统(生物梅里埃):用于厌氧菌快速培养
2.BDFACSCantoII流式细胞仪(碧迪医疗):活细胞荧光标记分析
3.ThermoScientificQuantStudio5实时荧光定量PCR仪:毒素基因扩增检测
4.OlympusBX53荧光显微镜(1000油镜):孢子形态学观察
5.SartoriusMD8空气采样器:洁净区环境微生物监测
6.EppendorfBioSpectrometerbasic核酸蛋白分析仪:DNA纯度测定(A260/A280)
7.MettlerToledoSevenExcellencepH计:发酵液酸碱度监测(精度0.01)
8.MemmertINCOmed培养箱(CO2浓度控制0.1%)
9.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:短链脂肪酸定量分析
10.IlluminaMiSeq测序平台:全基因组序列分析