检测项目
1.酶活性测定:单位时间内催化底物转化量(U/mg),pH7.4条件下测定
2.比活力分析:单位蛋白质量对应的酶活性(U/mg),Bradford法校准
3.蛋白质浓度测定:紫外分光光度法(280nm),误差范围0.05mg/mL
4.热稳定性测试:37-60℃梯度温育后残余活性测定(%)
5.抑制剂敏感性:组胺/氨基胍半数抑制浓度(IC50)测定
检测范围
1.生物制药:重组DAO酶制剂纯度验证
2.食品工业:发酵制品中内源性DAO活性监测
3.临床样本:血清/血浆DAO水平定量分析
4.组织样本:肠黏膜/肝组织匀浆液酶提取物
5.工业酶制剂:固定化DAO载体催化效率评估
检测方法
1.ISO20776-1:2020《体外诊断系统-抗菌剂敏感性试验》改良法
2.GB/T23527-2009《蛋白酶活力测定方法》分光光度法
3.ASTME2694-21《酶活性测量标准指南》动力学分析法
4.GB5009.224-2016《食品中二胺氧化酶的测定》HPLC联用法
5.ISO21572:2019《食品过敏原检测分子生物学方法》免疫印迹验证
检测设备
1.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:波长范围340-850nm,精度1%
2.Agilent1260InfinityIIHPLC系统:配备DAD检测器(190-950nm)
3.EppendorfMastercyclerX50梯度PCR仪:温控精度0.1℃
4.BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机:最大转速100,000g
5.MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪:粒径测量范围0.3nm-10μm
6.ShimadzuUV-2600i分光光度计:带宽1nm,波长准确度0.3nm
7.MettlerToledoSevenExcellencepH计:分辨率0.001pH单位
8.SartoriusQuintix224-1CN分析天平:称量精度0.1mg
9.MemmertINCOmed培养箱:温度均匀性0.3℃
10.Bio-RadChemiDocMP成像系统:CCD分辨率13601024像素