检测项目
1.病毒核酸检测:采用qPCR技术定量分析MAdVDNA载量(灵敏度≤10copies/μL)
2.血清抗体IgG/IgM检测:ELISA法测定抗体效价(检测限1:100)
3.病毒分离培养:接种敏感细胞系(如C127细胞)观察CPE效应
4.透射电镜观察:负染法鉴定典型二十面体病毒颗粒(分辨率0.2nm)
5.免疫组化分析:石蜡切片中病毒抗原定位(一抗效价≥1:500)
检测范围
1.实验小鼠组织样本:肝、脾、肺等器官匀浆液
2.细胞培养物:干细胞系、肿瘤细胞系等生物材料
3.生物制品:实验用疫苗、血清及单克隆抗体中间品
4.环境样本:IVC笼具表面拭子及空气悬浮颗粒物
5.饲料与垫料:灭菌后微生物负载验证样本
检测方法
1.实时荧光定量PCR:依据GB/T37871-2019《实验动物病原核酸检测通则》
2.酶联免疫吸附试验:参照ISO17025:2017《检测实验室能力通用要求》
3.病毒分离培养法:执行ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》
4.免疫荧光染色法:符合ASTME1488-12《细胞培养污染检测指南》
5.WesternBlot验证:遵循GB/T34791-2017《蛋白质印迹法通则》
检测设备
1.ABIQuantStudio7Pro实时荧光定量PCR仪:核酸绝对定量分析
2.BioTekSynergyH1多功能酶标仪:96孔板吸光度/荧光值读取
3.BeckmanCoulterOptimaXPN-100超速离心机:病毒颗粒富集(最大转速100,000g)
4.ThermoFisherScientificEVOSM7000成像系统:细胞病变效应记录
5.JEOLJEM-1400Flash透射电子显微镜:病毒形态学鉴定
6.LeicaCM1950冰冻切片机:组织样本低温处理(切片厚度5μm)
7.EppendorfCentrifuge5430R高速离心机:样本前处理(最大容量4750mL)
8.MiltenyiBiotecGentleMACSOcto解离仪:组织匀浆制备(8通道并行处理)
9.SartoriusCubisII精密天平:称量精度0.01mg
10.ThermoScientificHeracellVIOS160iCO2培养箱:细胞培养环境控制