定量蛋白组学分析

定量蛋白组学分析是通过高精度技术手段对复杂生物样本中的蛋白质进行系统性定量的方法,涵盖表达水平、翻译后修饰及相互作用研究。核心检测要点包括质谱分辨率、动态范围控制、标准化数据处理流程及生物信息学验证,确保结果的可重复性与临床/科研应用价值。

原创阅读 72025-04-18工程师CMACNASISO高新技术企业

检测项目

1. 蛋白质表达量测定:基于iBAQ/LFQ算法定量,灵敏度≥0.1 fmol

2. 磷酸化位点分析:TiO2富集结合MS/MS鉴定,定位精度±0.02 Da

3. 糖基化修饰定量:HILIC色谱分离,可识别≥8种糖型结构

4. 蛋白相互作用网络:Co-IP联合SWATH-MS技术,覆盖度>5000个互作对

5. 亚细胞定位验证:SILAC标记结合超速离心分级,分辨率达0.1 g/mL梯度

检测范围

1. 临床样本:血清/血浆(抗凝剂类型:EDTA/肝素/柠檬酸钠)

2. 生物材料:细胞裂解液(哺乳动物/昆虫/原核表达系统)

3. 药物研发:单克隆抗体(IgG1/IgG4亚型)、ADC药物

4. 食品基质:乳制品(酪蛋白/乳清蛋白比例)、转基因作物

5. 环境样本:微生物膜蛋白(污水处理系统生物膜)

检测方法

1. ISO 10993-18:2020 医疗器械生物材料蛋白质吸附评估

2. ASTM E3134-17 基于LC-MS/MS的定量蛋白质组学标准指南

3. GB/T 38165-2019 人源化单抗药物糖基化修饰检测规程

4. ISO 21314-2019 食品过敏原蛋白质质谱筛查方法

5. GB/T 39560-2021 环境微生物功能蛋白组分析技术规范

检测设备

1. Thermo Fisher Q Exactive HF-X:Orbitrap质谱仪,分辨率240,000@m/z 200

2. Agilent 6495 Triple Quadrupole:MRM模式定量精度CV<5%

3. Bruker timsTOF Pro 2:4D蛋白质组学分析,迁移率分辨率>200 R

4. Waters ACQUITY UPLC M-Class:75μm毛细管柱耐受压力20,000 psi

5. SCIEX ZenoTOF 7600:电子活化解离技术(EAD)碎片化效率>90%

6. Eppendorf Centrifuge 5430 R:温控范围-20℃至40℃,最大RCF30,130×g

7. Miltenyi MACSQuant Tyto:微流控细胞分选系统捕获效率>95%

8. NanoTemper Prometheus NT.48:纳米差示扫描荧光法测定蛋白稳定性

9. Cytiva ÄKTA pure 25:层析系统UV检测波长范围190-700 nm

10. Illumina NovaSeq 6000:转录组关联分析通量6 Tb/run

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

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