检测项目
1. 蛋白质分子量测定:SDS-PAGE凝胶电泳分离(4-20%梯度胶),Marker参照范围10-250 kDa
2. 特异性抗体验证:一抗效价≥1:1000,二抗交叉反应性≤5%
3. 转膜效率评估:PVDF膜孔径0.45μm,转印电流300mA/90min
4. 信号显影分析:化学发光法检测限≤1pg/μL
5. 定量重复性验证:CV值≤15%(n=3)
检测范围
1. 重组蛋白制品:大肠杆菌/哺乳动物细胞表达系统产物
2. 细胞裂解液样本:总蛋白浓度≥1μg/μL
3. 血清/血浆样本:IgG类抗体特异性检测
4. 组织匀浆液:脑/肝/肾等哺乳动物组织提取物
5. 病毒蛋白组分:包膜蛋白/核衣壳蛋白分离鉴定
检测方法
ISO 19642:2020《蛋白质印迹分析通用技术要求》
GB/T 34777-2017《免疫印迹法测定抗体效价》
ASTM E3106-18《Western Blot定量分析标准指南》
YY/T 1180-2021《免疫组化及免疫印迹试剂盒》
ISO 15189:2022《医学实验室质量与能力要求》
检测设备
1. Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra电泳系统:4通道垂直电泳槽
2. Trans-Blot Turbo转印系统(货号1704150):7分钟快速转膜
3. Tanon 5200化学发光成像仪:CCD分辨率600万像素
4. Eppendorf Centrifuge 5430R:最大转速15,300rpm
5. Thermo Scientific Pierce BCA蛋白定量试剂盒(货号23225)
6. LI-COR Odyssey CLx双色红外成像系统:680/800nm双通道
7. Amersham Hybond-P PVDF膜(货号10600023)
8. GE Healthcare AKTA pure蛋白纯化系统
9. Beckman Coulter JS-1060光密度扫描仪
10. Sartorius Quintix电子天平(精度0.01mg)