检测项目
1. 启动子/终止子元件检测:CaMV 35S启动子(18-2000拷贝数)、NOS终止子(25-1500拷贝数)
2. 标记基因筛查:nptII(50-5000 copies/μl)、bar基因(30-3000 copies/μl)
3. 转化事件特异性检测:MON810(LOD 0.01%)、Roundup Ready Soybean 40-3-2(LOD 0.05%)
4. 蛋白质表达分析:CP4 EPSPS蛋白(0.1-10 ng/mg)、Cry1Ab蛋白(0.05-5 ng/mg)
5. 外源DNA片段定量:转基因成分含量测定(0.1%-100%±5%)
检测范围
1. 初级农产品:大豆粉(颗粒度≤250μm)、玉米籽粒(破碎率≥95%)
2. 加工食品:植物蛋白提取物(DNA片段≥100bp)、食用油(酸价≤3mg/g)
3. 饲料原料:豆粕(水分≤12%)、青贮饲料(pH≤4.5)
4. 种子材料:杂交种净度≥99%、发芽率≥85%的育种材料
5. 食品添加剂:改性淀粉(灰分≤0.8%)、酶制剂(活力≥85%)
检测方法
1. DNA提取:ISO 21571:2005(CTAB法)、GB/T 19495.3-2004(磁珠法)
2. PCR扩增:GB/T 19495.5-2018(三重PCR体系)、ISO 24276:2006(巢式PCR)
3. 实时荧光定量PCR:SN/T 1196-2020(TaqMan探针法)、GB/T 33526-2017(SYBR Green法)
4. 蛋白质免疫印迹:GB/T 19495.8-2018(硝酸纤维素膜法)、AOAC Official Method 999.06
5. 基因芯片筛查:SN/T 4283.2-2018(50个靶标位点)、ASTM F2606-08(微阵列验证)
检测设备
1. Thermo Fisher QuantStudio 5:实时荧光定量PCR仪(96孔板),支持TaqMan探针多重检测
2. Agilent 2100 Bioanalyzer:微流控芯片系统,DNA/RNA完整性指数(RIN≥7)分析
3. Bio-Rad ChemiDoc MP:化学发光成像系统,CCD分辨率2048×2048像素
4. Eppendorf Mastercycler X50s:梯度PCR仪,温控精度±0.1℃
5. Illumina MiSeqDx:二代测序平台,读长2×300bp(Q30≥80%)
6. PerkinElmer Janus G3工作站:自动化移液系统,移液精度CV≤2%
7. Beckman Coulter Biomek i7:磁珠法核酸提取仪,通量96样本/批次
8. Waters ACQUITY UPLC H-Class:超高效液相色谱仪(C18柱),蛋白分离时间≤15min
9. Milestone ETHOS UP:微波消解系统(温度260℃±3℃),适用于高油脂样品前处理
10. Sartorius Cubis II MSA225S-1CE-DA:微量天平(0.01mg分辨率),符合GLP规范