检测项目
1. 端粒酶活性定量检测：TRAP法测定活性单位（TAU），灵敏度≥0.1 IU/μg蛋白
2. 端粒长度动态监测：Southern blot法测定平均端粒长度（kb），分辨率±0.2 kb
3. 基因表达谱分析：qPCR定量hTERT mRNA表达量（Ct值），扩增效率90-110%
4. 蛋白质互作验证：Co-IP法检测端粒酶复合体（TERT/TERC/DKC1）结合效率
5. 细胞衰老表型评估：SA-β-gal染色阳性率（λ=490nm），阈值设定≥15%判定阳性
检测范围
1. 人源细胞系（原代/永生化）：包括HEK293、HUVEC及患者来源iPSC
2. 动物模型组织样本：小鼠/大鼠肝/肾/脑组织切片（厚度4-6μm）
3. 临床外周血单核细胞：采集量≥5mL EDTA抗凝血
4. 抗衰老药物制剂：小分子化合物（纯度≥98%）、siRNA/miRNA制剂
5. 基因编辑工具验证：CRISPR/Cas9构建体转染效率≥70%
检测方法
1. TRAP法：ISO 23118:2021《体外端粒酶活性测定技术规范》
2. Flow-FISH法：ASTM E3134-18《流式荧光原位杂交端粒长度测定》
3. qRT-PCR：GB/T 37875-2020《核酸定量测定通用要求》
4. Western blotting：ISO 19642:2020《蛋白质免疫印迹分析通则》
5. 高通量测序：GB/T 34797-2017《二代测序数据质量评价》
检测设备
1. qPCR仪（Bio-Rad CFX96）：支持SYBR Green/FAM双通道检测
2. 流式细胞仪（BD FACSCanto II）：配置488nm/640nm双激光系统
3. 全自动化学发光仪（PerkinElmer EnVision）：灵敏度0.01pg/mL
4. 超速离心机（Beckman Optima XPN-100）：最大转速100,000rpm
5. 显微成像系统（Olympus VS200）：配备60×油镜及DAPI/FITC/TRITC滤光片组
6. 核酸定量仪（Thermo NanoDrop One）：检测范围2-27,500ng/μL dsDNA
7. CO2培养箱（Thermo Forma 3111）：温度控制精度±0.1℃
8. 电泳系统（Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra）：支持DNA/RNA/蛋白分离
9. 超低温冰箱（Haier DW-86L728）：-86℃恒温存储系统
10. 生物安全柜（ESCO Airstream ACB-4E）：H14级HEPA过滤系统