检测项目

1. 酶活性测定：采用[³H]肉豆蔻酰-CoA放射性标记法，灵敏度≥0.1 pmol/min/mg

2. 底物特异性分析：测试12种酰基供体（C12-C18）的Km值范围0.5-8.0 μM

3. 动力学参数测定：Vmax（0.2-5.0 nmol/min）、Kcat（0.05-1.2 s⁻¹）

4. 抑制剂筛选：IC50测定精度±5%，支持96/384孔板高通量检测

5. 热稳定性分析：通过CD光谱测定Tm值（45-65℃），温度梯度±0.1℃

检测范围

1. 重组肉豆蔻酰转移酶蛋白制剂（纯度≥90%）

2. 哺乳动物细胞裂解液（总蛋白浓度1-10 mg/mL）

3. 基因编辑细胞系（CRISPR敲除/过表达模型）

4. 小分子抑制剂候选化合物（溶解度≥10 mM）

5. 临床组织样本（冷冻保存≤-80℃，冻融≤3次）

检测方法

ISO 15193:2009 体外诊断医疗器械生物源性样品中量的测量参考测量程序

GB/T 37864-2019 生物样品中蛋白质翻译后修饰检测通则

ASTM E2935-17 酶活性测定的标准实施规程

ISO/IEC 17025:2017 检测和校准实验室能力通用要求

GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范 食品理化检测

检测设备

1. PerkinElmer Tri-Carb 4910TR液体闪烁分析仪：放射性信号测量（3H/14C）

2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统：酰基化产物分离（C18色谱柱）

3. Beckman Coulter DTX880微孔板读数仪：荧光强度检测（Ex/Em=340/440 nm）

4. Malvern Panalytical MicroCal PEAQ-DSC差示扫描量热仪：热稳定性分析

5. Thermo Scientific Orbitrap Exploris 480质谱仪：酰化位点鉴定（分辨率≥240,000）

6. Hitachi F-7100荧光分光光度计：酶促反应实时监测

7. Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪：温度梯度实验（25-95℃）

8. Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统：Western blot定量分析（16-bit动态范围）