检测项目
1. 酶活性测定:比活力(U/mg)、Km值(μM)、Vmax(nmol/min)
2. 底物特异性分析:SAM/SAH结合常数(Kd, nM)、组蛋白H3K4/K27/K36位点识别率(%)
3. 抑制剂筛选:IC50值(μM)、抑制类型(竞争性/非竞争性)
4. 热稳定性测试:Tm值(℃)、半衰期(h@37℃)
5. 金属离子依赖性:Mg²⁺/Zn²⁺浓度梯度(0-10mM)响应曲线
检测范围
1. 重组蛋白制剂:原核/真核表达系统纯化酶样品
2. 细胞裂解液:肿瘤细胞系/干细胞系胞内提取物
3. 临床样本:血清/组织活检样本中异常甲基化标志物
4. 药物候选化合物:小分子抑制剂/激活剂高通量筛选
5. 诊断试剂盒:甲基化水平定量校准品与质控品
检测方法
1. 放射性标记法:ISO 15194:2009 同位素掺入定量标准
2. 荧光偏振法:ASTM E2878-19 动态结合参数测定规范
3. 质谱分析法:GB/T 37864-2019 翻译后修饰鉴定技术规程
4. ELISA定量法:GB/T 33412-2016 酶联免疫吸附测定通则
5. 表面等离子共振:ISO/TS 19101-2:2021 实时相互作用分析指南
检测设备
1. Beckman Coulter DTX880微孔板读数器:荧光强度/吸光度同步检测
2. Thermo Orbitrap Fusion Lumos质谱仪:高分辨率甲基化位点解析
3. GE Healthcare Biacore T200 SPR仪:实时分子互作动力学分析
4. PerkinElmer Tri-Carb 4910TR液闪仪:[³H]-SAM放射性信号采集
5. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统:反应产物色谱分离定量
6. Malvern Panalytical MicroCal PEAQ-DSC:热稳定性差示扫描量热
7. Eppendorf Mastercycler X50s PCR仪:温度梯度反应条件优化
8. BioTek Synergy H1混合型多功能读板机:多波长同步扫描分析
9. Bruker Daltonics timsTOF Pro质谱平台:4D蛋白质组学深度表征
10. Shimadzu RF-6000荧光分光光度计:激发/发射光谱全波段扫描