检测项目

1. 酶活性测定：采用放射性同位素法测定红细胞裂解液中TPMT活性（0.1-30 U/mL RBC）

2. 基因分型检测：PCR-RFLP法分析TPMT*2(rs1800462)、*3A(rs1142345)、*3B(rs1800460)、*3C(rs75543815)突变位点

3. 代谢产物浓度：LC-MS/MS定量6-硫鸟嘌呤核苷酸（6-TGN）与6-甲基巯基嘌呤（6-MMP）浓度（线性范围0.1-100 ng/mL）

4. 热稳定性测试：37℃孵育30min后残余酶活性测定（稳定性阈值≥70%）

5. 抑制剂敏感性：甲硝唑抑制试验（IC50值测定范围1-100 μM）

检测范围

1. 全血样本：EDTA抗凝外周血（采集后8h内完成处理）

2. 组织样本：肝穿刺活检组织（液氮速冻保存）

3. 细胞培养物：HEK293T重组表达体系

4. 药物制剂：硫唑嘌呤/6-巯基嘌呤原料药及制剂

5. 诊断试剂盒：TPMT活性测定试剂盒（冻干粉复溶稳定性测试）

检测方法

1. ISO 15189:2012《医学实验室质量和能力要求》

2. CLSI EP17-A2《检出限与定量限测定指南》

3. GB/T 37864-2019《生物样本中基因突变检测规程》

4. ASTM E3066-16《液相色谱-串联质谱法标准指南》

5. GB/T 27417-2017《合格评定 化学分析方法确认和验证指南》

检测设备

1. Thermo Fisher TSQ Altis三重四极杆质谱仪（代谢产物定量分析）

2. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统（硫嘌呤类化合物分离）

3. Bio-Rad CFX96 Touch实时荧光定量PCR仪（SNP分型检测）

4. Beckman Coulter AU5800全自动生化分析仪（酶动力学测定）

5. Eppendorf Mastercycler X50梯度PCR仪（基因扩增）

6. PerkinElmer Tri-Carb 4910TR液闪计数器（14C-S-腺苷甲硫氨酸计数）

7. Thermo Scientific Multiskan SkyHigh酶标仪（比色法终点检测）

8. Miltenyi Biotec GentleMACS Octo解离仪（组织样本均质化处理）

9. Sartorius Cubis II半微量天平（精密称量±0.01mg）

10. Memmert INCOmed细胞培养箱（CO₂浓度控制±0.1%）