检测项目

1. 酶活性定量分析：测定单位时间内底物转化量（U/mg蛋白），线性范围0.05-5.0 U/mg

2. DPYD基因多态性检测：包括*2A (c.1905+1G>A)、*13 (c.1679T>G)等8个临床相关SNP位点

3. 代谢产物浓度测定：二氢尿嘧啶/尿嘧啶比值（UH2/U），参考区间≥1.5

4. 热稳定性测试：37℃孵育30分钟后的残余活性百分比（≥80%为正常）

5. 抑制剂敏感性试验：测定EDP（Ethynyluracil）的IC50值（正常范围0.8-1.2 μM）

检测范围

1. 肿瘤患者外周血单核细胞（PBMC）样本

2. 人源化肝微粒体体外代谢模型

3. 氟尿嘧啶类前药（卡培他滨、替吉奥）的体外转化体系

4. 转基因细胞系（DPYD过表达/敲除模型）

5. 食品及环境样品中嘧啶类化合物残留

检测方法

1. ISO 15193:2009 临床酶学参考测量程序

2. ASTM E2935-13 体外酶活性动力学分析标准指南

3. GB/T 37876-2019 药物基因组学检测技术指南

4. CLSI EP05-A3 精密度性能验证方案

5. GB 4789.41-2016 食品微生物学检验标准

检测设备

1. Agilent 1260 Infinity II HPLC：配备二极管阵列检测器（DAD），用于代谢产物分离定量

2. Thermo Fisher QuantStudio 7 Pro实时荧光定量PCR仪：支持HRM高分辨率熔解曲线分析

3. Beckman Coulter AU5800全自动生化分析仪：实现酶动力学连续监测（340nm波长）

4. Waters Xevo TQ-S质谱系统：UHPLC-MS/MS法测定痕量代谢物（LOQ=0.1ng/mL）

5. Bio-Rad ChemiDoc MP成像系统：Western blot法定量DPD蛋白表达水平

6. Eppendorf Mastercycler X50梯度PCR仪：完成DPYD基因扩增及测序文库制备

7. PerkinElmer EnVision多模式读板机：荧光偏振法高通量SNP分型（384孔板）

8. Sartorius Cubis II超微量天平：称量精度0.1μg（符合ISO 17025标准）

9. Memmert INCOmed细胞培养箱：维持37℃±0.1℃恒温环境（CO₂浓度控制±0.2%）

10. Malvern Zetasizer Nano ZSP动态光散射仪：测定酶蛋白溶液粒径分布及聚集状态