检测项目

1. 酶活性测定：比色法（吸光度范围280-420nm）或荧光法（激发/发射波长340/460nm），灵敏度≥0.01U/mg

2. 动力学参数分析：Km值（0.1-100μM）、kcat值（0.5-50s⁻¹）测定

3. 底物特异性验证：针对SAM/SAH类似物的结合效率（IC50值≤10μM）

4. 抑制剂筛选：半数抑制浓度IC50（精度±5%），Z'因子≥0.6

5. 热稳定性测试：Tm值测定（温度范围25-95℃，精度±0.1℃）

检测范围

1. 重组甲基转移酶制剂（纯度≥90%）

2. 细胞裂解液样本（总蛋白浓度1-10mg/mL）

3. 药物候选分子库（化合物分子量≤500Da）

4. 天然产物提取物（溶剂残留≤0.1%）

5. 体外诊断试剂盒（冻干粉复溶稳定性≥24h）

检测方法

1. ISO 20633:2018《体外诊断系统-甲基转移酶活性测定参考程序》

2. ASTM E2935-18《酶促反应动力学参数标准测试方法》

3. GB/T 35823-2018《生物制品中甲基化修饰检测通则》

4. GB/T 38483-2020《酶抑制剂筛选试验指南》

5. ISO 10993-18:2020《生物样品热稳定性差示扫描量热法》

检测设备

1. Agilent 1260 Infinity II HPLC（色谱纯度分析）

2. Thermo Scientific Varioskan LUX多功能酶标仪（荧光/吸光度检测）

3. Malvern Panalytical MicroCal PEAQ-DSC（差示扫描量热仪）

4. Waters Xevo G2-XS QTOF质谱仪（分子量精确测定）

5. Beckman Coulter ProteomeLab XL-I分析超速离心机（分子相互作用分析）

6. PerkinElmer Lambda 365 UV-Vis分光光度计（波长范围190-1100nm）

7. Bruker BioSpin AVANCE NEO 600MHz核磁共振仪（结构确证）

8. Eppendorf BioSpectrometer kinetic（实时动力学监测）

9. GE Healthcare ÄKTA pure 25蛋白纯化系统（酶制剂制备）

10. Molecular Devices SpectraMax i3x高通量筛选平台（384孔板检测）